フローサイトメトリー用 ビオチン標識 ウサギ抗マウスCD45 モノクローナル抗体 - P06800

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：CD45 (PTPRC) の機能と局在

• CD45（受容体型チロシンプロテインホスファターゼC）は、普遍的に発現する白血球共通抗原（L-CA）であり、Ly-5およびT200としても知られる。選択的スプライシングにより、Bリンパ球に主に見られるB220（CD45R）を含む複数のアイソフォームが生成される。
• 2つの細胞内チロシンプロテインホスファターゼ（PTP）ドメインを含む。最初のドメインは酵素活性を持ち、2番目のドメインは基質特異性を調節する。
• CD45は、抗原受容体を介したT細胞活性化に必須であり、DPP4への結合による共活性化の正の調節因子として機能する。
• T細胞活性化時、CD45はSKAP1とFYNをリクルートして脱リン酸化し、またLYNを脱リン酸化してそのキナーゼ活性を調節する。
• 抗原提示細胞-T細胞界面では、CD45は未成熟樹状細胞上のCLEC10Aと相互作用し、これはエフェクターT細胞上のTn抗原修飾CD45を認識し、自己反応性を制限するために活性化閾値を調整する。
• 細胞膜、膜ラフト、および免疫シナプスに局在し、シグナル伝達における役割と一致する。
• 翻訳後修飾には、重いN結合型グリコシル化とセリン/スレオニン残基のリン酸化が含まれる。
• CD45はチロシンプロテインホスファターゼファミリーの一員であり、クラスI受容体型PTPに属する。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• フローサイトメトリーでは、ビオチン化抗体を濃度範囲（例：0.1–5 µg/テスト）で滴定し、特定の細胞モデルと二次ストレプトアビジンコンジュゲートを用いた最適な染色指数を決定してください。
• 特にストレプトアビジン-PEやストレプトアビジン-APCなどの増幅検出システムを使用する場合、適切なアイソタイプコントロール染色を含めて、背景結合を評価してください。
• 使用前に、関連するマウス白血球集団（例：脾細胞、リンパ節細胞、末梢血単核球）で抗体を検証し、期待される発現と分解能を確認してください。
• ビオチン標識は柔軟性を提供する。単色または多色パネル用に、装置のレーザーとフィルターに適合したストレプトアビジンコンジュゲートの使用を検討してください。
• 間接検出の場合、一次インキュベーション後に十分な洗浄ステップを確保し、未結合抗体を減らし、非特異的シグナルを最小限に抑えてください。

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