WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用CD11b Rabbit PolymAb®モノクローナル抗体 - P11215 / P05555

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：ITGAM（CD11b）の機能と局在

• ITGAMはインテグリンα-M（CD11b）をコードします。CD11bはインテグリンβ-2（CD18）と対を形成してMac-1（CR3）複合体を構成する膜貫通受容体であり、自然免疫における主要な接着分子です。
• C3のiC3bフラグメントに結合することで補体受容体として機能し、補体オプソニン化病原体の貪食を媒介します（PubMed:20008295、PubMed:9558116）。 関連文献： PMID:20008295 PMID:9558116
• ICAM1との相互作用を介して、刺激を受けた内皮細胞への好中球の接着を媒介し、白血球の血管外遊出および移動を促進します（PubMed:1980124）。 関連文献： PMID:1980124
• CD18とともに、CD177-PRTN3を介したTNFプライミング好中球の活性化に必要であり、炎症反応を増幅します（PubMed:21193407）。 関連文献： PMID:21193407
• 好中球の移動を調節し、自然免疫防御に寄与します（PubMed:28807980）。 関連文献： PMID:28807980
• 細胞内では細胞膜および膜ラフトに局在し、そこでシグナル伝達分子と相互作用します。
• 主に単球、顆粒球、好中球で発現しており、骨髄系細胞に限定された機能と一致します。
• 選択的スプライシングおよび広範なN-グリコシル化を受けます。また、活性に必須の複数のカルシウム結合・マグネシウム結合リピートを含みます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトCD11bのN末端アミノ酸1～100に相当します。エピトープマップがこの領域内に位置する場合、または翻訳後修飾によってアクセシビリティが変化する場合、抗体結合が影響を受ける可能性があります。
• 還元条件下でのウェスタンブロッティング（WB）では、約127 kDaのバンドが予想されます。高分子量マーカーを使用し、十分なタンパク質転写時間を確保することを推奨します。
• IHC-P解析を行う際は、抗原賦活化法（例：クエン酸緩衝液、pH 6.0）および一次抗体希釈倍率を複数検討し、核／膜特異的シグナルを最適化してください。
• IF/ICCでは、膜抗原の完全性を維持する細胞透過化プロトコルおよび固定法を検討してください。局在が予想される細胞膜染色と一致することを確認してください。
• 本抗体はマウスおよびラットのCD11bと交差反応します。ただし、特異性を確保するため、必ず関連するサンプル系でバリデーションを行ってください。
• ELISAでは、CD11bを標的とするサンドイッチペアリングにおいて、捕捉抗体として評価できます。組換えタンパク質標準品を用いて性能を確認してください。

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