シトルリン-ヒストンH3（R8 シトルリン化）ラビットモノクローナル抗体 (Q16695/P68431) for WB, DB, ELISA

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

ヒストンH3はヌクレオソームのコア構成要素であり、DNAをクロマチンに巻き付けて凝縮させる役割を担っています。この構造的な役割は、DNAのアクセシビリティを調節する上で重要であり、それによって転写、DNA修復、複製、染色体の安定性などの基本的なプロセスを制御しています。H3を含むヒストンは、クロマチン構造と遺伝子発現を動的に調節する「ヒストンコード」と呼ばれる複雑な翻訳後修飾を受けています。

この抗体は、ヒストンH3のアルギニン8（R8）部位のシトルリン化を特異的に検出します。アルギニンからシトルリンへの変換であるシトルリン化は、ペプチジルアルギニンデイミナーゼ（PAD）によって媒介され、遺伝子調節、NETosis、および自己免疫疾患に関与していることが示唆されています。ヒストンH3は、R3、R8、R17、R26を含む複数の残基でシトルリン化されることが知られており、これらの修飾はクロマチンの凝縮に影響を与える可能性があります。関連参考文献： PMID:16567635。

この抗体が認識する2つのSWISS-PROTアクセッション番号、Q16695（ヒストンH3.1t）およびP68431（ヒストンH3.1）は、異なるヒストンバリアントを表しています。Q16695は精巣細胞で発現する精巣特異的なH3バリアントであり、一方P68431は普遍的に発現する典型的な複製依存性ヒストンH3.1に相当します。両方とも核と染色体に局在します。

ヒストンH3は、アセチル化、メチル化、リン酸化、シトルリン化、およびその他の多くのマークを含むN末端テールで広範に修飾されます。これらの修飾は動的に調節され、クロマチン修飾複合体の結合プラットフォームとして機能し、それによって細胞のアイデンティティと環境シグナルに対する応答を制御します。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• ウェスタンブロット（WB）の場合、レーンあたり10～20 µgの全細胞ライセートを使用することを検討してください。関連するサンプルシステム（例：シトルリン化が誘導された刺激細胞）で抗体を検証し、適切な陽性および陰性コントロールを含めてください。
• ドットブロット（DB）およびELISAの場合、シトルリン化ヒストンH3を特異的に検出するために、抗原コーティング濃度とバッファー条件を最適化してください。R8周辺の合成シトルリン化ペプチドは陽性コントロールとして使用できます。
• シトルリン化は一過的かつ酵素依存的である可能性があるため、サンプルの調製では翻訳後修飾を保存する必要があります。PAD阻害剤の使用、または適切なホスファターゼ/プロテアーゼ阻害剤を用いた迅速な溶解を検討してください。
• このラビットモノクローナル抗体は、様々なヒトサンプルタイプにおけるシトルリン化のダイナミクスを調査するために使用できます。他の種との交差反応性は広範囲であると予測されますが、エンドユーザーは独自の実験モデルで確認する必要があります。

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