WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 補体C3 ウサギポリクローナル抗体 - P01024

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：補体C3の機能と局在

• 補体C3は、すべての補体経路（古典経路、第二経路、レクチン経路、GZMK）に不可欠な非酵素成分の前駆体であり、貪食、病原体の分解、および適応免疫シグナル伝達に至るカスケードを開始します。 関連参考文献： PMID:28264884 PMID:31507604 PMID:3653927 PMID:6903192
• C3コンバーターゼによる切断によりC3bが生成されます。C3bはその反応性チオエステル結合を介して病原体表面に共有結合し、オプソニンとして作用します。また、C4bと協働してC2b（古典経路/レクチン経路）またはCFB（第二経路）を募集し、C5コンバーターゼを集合させます。 関連参考文献： PMID:28264884 PMID:31507604 PMID:3653927 PMID:12878586 PMID:18204047 PMID:2387864 PMID:624565 PMID:6554279
• C3aフラグメントは強力なアナフィラトキシンとして作用し、C3AR1に結合してGタンパク質共役シグナル伝達を引き起こします。これにより受容体のリン酸化と内在化が生じ、肥満細胞と好塩基球を刺激してサイトカイン、ケモカイン、ヒスタミンを放出させ、局所的な炎症を駆動します。 関連参考文献： PMID:6968751 PMID:37169960 PMID:37852260 PMID:8702752 PMID:23383423
• C3aはまた、走化性因子としても機能し、マクロファージと好中球を炎症組織へ誘導し、貪食と活性酸素種を通じて誘因の中和を促進します。 関連参考文献： PMID:23383423 PMID:342601 PMID:5778786
• 免疫学的な役割に加え、C3は脂肪生成ホルモン（アシル化刺激タンパク質）としても作用し、C5AR2に結合してPLC、MAPK、AKT経路を活性化させ、脂肪細胞におけるトリグリセリド合成とグルコース輸送を刺激することで、脂肪蓄積と食後脂質クリアランスを調節します。 関連参考文献： PMID:10432298 PMID:15833747 PMID:16333141 PMID:11773063 PMID:12540846 PMID:19615750
• 補体C3は血漿中に分泌され、細胞表面にも局在することがあります。主に肝細胞と脂肪細胞で大量に産生され、血漿中濃度は空腹時および食後の両方で検出可能です。
• このタンパク質は、ジスルフィド結合の形成、糖鎖付加、リン酸化、および重要なチオエステル結合を含む著しい翻訳後修飾を受けます。変異は、加齢黄斑変性症および非典型溶血性尿毒症症候群に関与しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒト補体C3のC末端領域（aa 1364-1663）に相当し、これにはC3bフラグメントの一部とチオエステルドメインが含まれます。この領域は種間で高度に保存されており、マウスおよびラットとの観察された交差反応性と一致しています。
• ウェスタンブロットでは、187 kDaのタンパク質を完全に分離するために、還元および変性条件の使用を検討してください。複数のジスルフィド結合が存在するため、非還元条件下ではスミアやオリゴマー化を引き起こす可能性があります。
• 免疫組織化学（IHC）については、組織の種類に応じて抗原回収と固定プロトコルを最適化してください。C3の発現量が多いため、肝臓および脂肪組織のサンプルをポジティブコントロールとして使用することをお勧めします。
• この抗体は免疫蛍光およびELISAにも適しています。適切なブロッキングおよびインキュベーション緩衝液は、実験的に決定する必要があります。
• ポリクローナル抗体として、免疫原上の複数のエピトープを認識するため、変性条件下でのアプリケーションにおいてシグナルを増強する可能性があります。特定の実験コンテキストで性能を検証してください。

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