エピジェネティクス研究およびChIP用 DiMethyl-Histone H3-K27 ウサギポリクローナル抗体 (Q16695/P68431)

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

ヒストンH3は、クロマチンの基本単位であるヌクレオソームのコア構成要素です。ヌクレオソームはDNAを巻き付け凝縮し、細胞内機構によるDNAへのアクセスを制限することで、転写調節、DNA修復、DNA複製、染色体安定性において中心的な役割を果たします。

ヒストンH3は、アセチル化、メチル化、リン酸化、シトルリン化など、多様な翻訳後修飾（PTM）を受けます。これらは総称して「ヒストンコード」と呼ばれ、クロマチン構造と遺伝子発現を動的に調節します。ヒストンH3のN末端尾部は特に修飾可能な残基が豊富で、リジン27（K27）はメチル化イベントの重要な部位です。H3K27のジメチル化（H3K27me2）は、転写抑制およびヘテロクロマチンの維持に関連しています。

ヒトゲノムは複数のヒストンH3バリアントをコードしています。Q16695（H3-4、別名H3.1t）は精巣特異的ヒストンであり主に精巣細胞で発現します。一方、P68431（H3C1/H3C2/H3C3/H3C4/H3C6/H3C7/H3C8/H3C10/H3C11/H3C12）は体細胞で発現する標準的な複製依存性H3.1バリアントを表します。両バリアントは高度に保存されており、K27が位置するN末端配列は同一です。これらは核および染色体に特異的に局在し、クロマチン繊維の不可欠な部分を形成します。

関連参考文献: UniProt Q16695, UniProt P68431

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• ウェスタンブロット（WB）では、ヒストンH3に対応する約15 kDaの単一バンドが期待されます。バンドの同定およびジメチル化特異性を確認するために、適切な陽性対照および陰性対照を使用してください。
• ChIPおよびChIP-seqでは、架橋（例：ホルムアルデヒド）およびクロマチン断片化条件を最適化してください。既知のH3K27me2標的遺伝子座の濃縮をqPCRまたは並列シーケンシングで検証することを検討してください。
• 本抗体はヒト、マウス、ラットと交差反応し、広範囲な反応性を持つと予測されます。ただし、大規模な実験を行う前に、対象とする特定の種および組織での性能を検証することをお勧めします。
• ELISAおよびドットブロット（DB）では、抗体を滴定し、非特異的結合を最小限に抑えるためのブロッキングステップを含めてください。ペプチド免疫原は陽性対照として使用できます。
• 免疫組織化学（IHC）および免疫蛍光（IF/ICC）では、ヒストンH3は核内に局在することに注意してください。核の局在を可視化するために対比染色（例：DAPI）が役立ちます。抗原賦活化が必要な場合があります。

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