WB、IF、IP、ELISA用 EED ウサギポリクローナル抗体 - O75530

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：EEDの機能と局在

• ポリコームタンパク質EED（胚性外胚葉発生タンパク質）は、HEED、COGIS、WAIT-1とも呼ばれ、ポリコーム抑制複合体2（PRC2）のコア構成要素です。選択的スプライシングおよび選択的開始により、複数のアイソフォームが生成されます。
• PRC2/EED-EZH2複合体の一部として、EEDはヒストンH3のリジン-9およびリジン-27をメチル化し、HOXC8、HOXA9、MYT1、CDKN2Aなどの標的遺伝子の転写的サイレンシングを引き起こします。
• EEDはリジン-26でトリメチル化されたヒストンH1（H1K26me3）を認識し、これはヌクレオソームH3K27に対するPRC2メチルトランスフェラーゼ活性を阻害します。一方、H3K27me3の認識は抑制マークを伝播させます。
• PRC2/EED-EZH2複合体はDNAメチルトランスフェラーゼをリクルートする可能性もあり、安定した遺伝子抑制のためのヒストン修飾とDNAメチル化の機能的関連を確立します。
• EEDは核に局在し、染色体と結合しており、クロマチン調節におけるその役割と一致しています。
• アセチル化、リン酸化、メチル化を含む複数の翻訳後修飾を受け、その活性と相互作用を調節する可能性があります。
• EEDはヒト組織全体で広く発現しており、特に乳がんおよび大腸がんで発現レベルが上昇していることが観察されており、がん発生への関与を支持しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトEEDのN末端400アミノ酸を含みます。この領域はフルレングスタンパク質および特定のアイソフォームを検出する可能性があります。実験系における特定のスプライスバリアントの検出を検証してください。
• ウェスタンブロット（WB）では、予測される分子量は約50 kDaです。適切な陽性対照および陰性対照を用いてバンドサイズを確認してください。
• 交差反応性はヒト、マウス、ラットに対して報告されています。必要に応じて、他の種との反応性を免疫原の配列アライメントで確認してください。
• 免疫蛍光/ICCでは、標準的な固定（例：4% PFA）および透過処理（例：0.1% Triton X-100）を行ってください。核染色が予想されます。
• 免疫沈降（IP）では、プロテインAまたはGビーズを使用し、抗体とリサートの比率を最適化してください。バックグラウンドを低減するためにリサートを事前クリアしてください。
• ELISAへの適合性が示されています。抗体を滴定し、組換えEEDタンパク質またはペプチドをコーティング抗原として使用してください。
• 特定のがんでEEDが過剰発現していることを考慮し、関連するがん細胞株（例：乳がん、大腸がん）を陽性対照として含めてください。

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