EGF受容体（E746-A750欠失特異的）ウサギポリクローナル抗体（WB、ELISA用） - P00533

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：EGF受容体（EGFR）の機能と局在

• EGFRは、EGFファミリーの複数のリガンド（EGF、TGFA、AREG、エピゲン、BTC、EREG、HBEGFなど）と結合する受容体型チロシンキナーゼです。リガンド結合によりホモ二量体化・ヘテロ二量体化、自己リン酸化が引き起こされ、RAS-RAF-MEK-ERK、PI3K-AKT、PLCgamma-PKC、STAT、NF‑kappa‑Bを含む下流のシグナル伝達経路が活性化されます。本抗体は、非小細胞肺癌で一般的に認められるE746‑A750欠失変異体に特異的です。 関連文献: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146 PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• EGFRのアイソフォーム2はEGF作用のアンタゴニストとして働く一方、代表的なアイソフォーム1が主なシグナル伝達受容体です。
• EGFRは細胞膜に局在しますが、小胞体、ゴルジ装置、核、エンドソームにも存在し、分泌されることもあります。
• このタンパク質はリン酸化、グリコシル化、ヒドロキシル化、パルミトイル化、メチル化、ユビキチン化を含む多彩な翻訳後修飾を受けており、これらが活性や細胞内輸送を調節しています。
• 全身に広く発現しており、アイソフォーム2は卵巣癌に追加で認められます。
• EGFRはC型肝炎ウイルス（HCV）侵入のための宿主細胞受容体としても機能し、CD81-CLDN1複合体の形成と膜融合を媒介します。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はE746-A750欠失を含む組換えタンパク質であり、本抗体が変異型エピトープを選択的に認識するよう設計されていることを示しています。実験者は、野生型EGFRを発現する細胞をネガティブコントロールとして使用し、特異性を確認する必要があります。
• ウエスタンブロッティングでは、EGFR E746‑A750del変異を保有することが知られているヒト癌細胞株（HCC827、H1975など）のタンパク質溶解物、または変異型EGFR組換えタンパク質の使用を推奨します。
• ELISAでは、組換えE746‑A750del EGFRタンパク質でコーティングすることが推奨されます。野生型EGFRとの交差反応が生じる可能性があることに留意し、適切なブロッキングと希釈率の最適化が必要です。
• WBおよびELISAにおける最適な使用濃度は経験的に決定する必要があります。ポリクローナル抗体の一般的な開始希釈率は1:500～1:2000の範囲です。

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