FC用FITC標識ウサギ抗ラットCD45モノクローナル抗体 - P04157

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD45の機能と局在

• CD45は、白血球共通抗原（L-CA）やT200とも呼ばれ、ラットではPTPRC遺伝子によってコードされています。これは、抗原受容体を介したT細胞活性化に必須な受容体型チロシンタンパク質ホスファターゼです。
• このタンパク質には2つのホスファターゼドメインがあります。第1ドメインは触媒活性を持ち、第2ドメインは基質特異性を調節します。CD45は、T細胞活性化時にSKAP1、FYN、LYNなどの重要なシグナル伝達分子を脱リン酸化します。
• CD45は、DPP4に結合するとT細胞の共活性化の正の制御因子として機能し、抗原提示細胞とT細胞の界面でCLEC10Aと相互作用して活性化の閾値を調節し、自己反応性を制限します。
• 細胞膜に局在しており、特に膜ラフトや免疫シナプスに濃縮されており、そこでT細胞受容体シグナル伝達に関与します。
• 代替スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。ラットでは、アイソフォーム1および2が胸腺細胞とリンパ節で見つかり、アイソフォーム3および4がリンパ節で検出されます。
• 翻訳後修飾には、高度な糖鎖付加とリン酸化が含まれ、これらはその機能およびリガンドとの相互作用に重要です。
• このタンパク質は、加水分解酵素、タンパク質ホスファターゼに分類され、重要な免疫プロセスに関与する膜貫通糖タンパク質です。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ラットCD45のアミノ酸24〜546から構成されており、これはおそらく細胞外ドメインに相当します。この設計により、一般的に細胞表面で発現しているCD45を認識する抗体が作製され、フローサイトメトリーに適しています。
• フローサイトメトリーを行う際は、特定の細胞種および染色条件に最適な濃度を決定するために、抗体の滴定を行ってください。適切なアイソタイプ対照および単色染色補正コントロールを使用してください。
• CD45は汎白血球マーカーであるため、サンプル調製が白血球の表面抗原を保持していることを確認してください。新鮮な細胞、または適切に凍結保存された細胞が推奨されます。
• CD45アイソフォームは、白血球のサブセットや活性化状態によって異なる場合があるため、目的の集団における抗体の染色パターンを検証し、関連するアイソフォームとの反応性を確認してください。

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