ホルミル化ヒストンH2B-K120 ウサギモノクローナル抗体 (P62807/Q16778) for WB, IHC-P, ELISA

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ホルミル化ヒストンH2Bの機能と局在

ヒストンH2Bはヌクレオソームのコア構成要素であり、DNAをクロマチンに巻き付けて凝縮することで、転写調節、DNA修復、DNA複製、染色体安定性において中心的な役割を果たします。DNAへの動的なアクセス性は、ヒストン上の複雑な翻訳後修飾（PTM）のセットである「ヒストンコード」によって制御されています。 関連文献: UniProt P62807, UniProt Q16778

ヒトヒストンH2Bは、アセチル化（例：K6、K12、K16、K21）、クロトニル化（K12）、リン酸化（S15）、およびK120でのホルミル化を含む広範なPTMを受けます。K120でのホルミル化は、クロマチン構造と遺伝子発現に微妙に影響を与える可能性のある新たな修飾ですが、その完全な生物学的意義については現在も活発に研究が行われています。 関連文献: PMID:16283522, PMID:16627869, PMID:21925322, PMID:12757711

構造的役割に加えて、H2Bは広範な抗菌活性を示し、結腸上皮の抗菌バリアや羊水の殺菌活性に寄与する可能性があります。 関連文献: UniProt P62807, UniProt Q16778

H2Bは主に核に局在し、染色体と関連しています。ヒトゲノムは、高度に保存された配列を共有するH2B type 1-C/E/F/G/I (P62807)やH2B type 2-E (Q16778)を含む複数のH2Bバリアントをコードしています。免疫原ペプチドはこれらのアイソフォーム間で保存された領域にまたがっており、予測される広範な交差反応性を支持しています。 関連文献: UniProt P62807, UniProt Q16778

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、リジン120がホルミル化されたヒトヒストンH2Bに対応する合成ペプチドです。本抗体は特異的にホルミル化H2B-K120を認識することが期待されます。特異性を確認するためには、非ホルミル化ペプチドや酵素的脱ホルミル化をネガティブコントロールとして使用することを検討してください。
• ウエスタンブロッティング（WB）では、約14 kDaのバンドが期待されます。核抽出物やヒストン濃縮試料を使用してください。低分子量マーカーおよびコントロールサンプル（例：未処理対ホルミラーゼ阻害剤処理）の使用を推奨します。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、ホルマリン固定パラフィン包埋切片で核内エピトープを露出させるために抗原賦活化が必要な場合があります。核染色が観察されるはずです。適切な組織コントロールで検証してください。
• ELISAでは、ホルミル化ペプチドをコーティングし、非修飾ペプチドをコントロールとして使用して結合特異性を評価してください。サンプルマトリックスに基づいてコーティング条件と抗体希釈率を最適化してください。
• 高い配列相同性のため、本抗体はヒト、マウス、ラットのH2Bと交差反応することが予測されますが、関連する種およびサンプルシステムでの検証を推奨します。
• 低分子修飾をマスクする可能性のある非特異的なブロッキング剤は避けてください。バックグラウンドが観察された場合は、BSAフリーのブロッカーまたは代替ブロッキング戦略を検討してください。

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