GRB2 ウサギモノクローナル抗体（WB用） - P62993

製品の主な仕様およびパラメータ

生物学的背景：GRB2の機能と局在

• GRB2は非酵素性アダプタータンパク質であり、細胞表面受容体から遺伝子発現や自然免疫・適応免疫、オートファジー、DNA修復、ネクロプトーシスなどの様々な生物学的プロセスを含む下流の細胞応答へのシグナルカスケードにおいて、重要なリンクとして機能します。 関連文献： PMID:11016927, PMID:11726515, PMID:37626338
• T細胞において、GRB2はTCR刺激時にリン酸化されたLATに結合し、SOS1をリクルートしてKRAS/RAF1/MAPK経路を活性化させ、それによってT細胞の活性化、分化、および機能を調節します。 関連文献： PMID:9489702, PMID:12171928, PMID:25870599, PMID:36864087
• 同様に、B細胞において、GRB2はリン酸化されたBCRへリクルートされると、Ca2+動員およびERK MAPキナーゼの活性化を増幅させます。 関連文献： PMID:25413232, PMID:29523808
• GRB2は、ネクロソーム構成因子（例：RIPK1）やオートファジー調節因子（例：SQSTM1、BECN1）との相互作用により、オートファジーとプログラムネクローシス（壊死）の切り替えを調節します。 関連文献： PMID:35831301, PMID:38182563
• AGO2およびDICER1との三重複合体を形成することにより、miRNAのバイオジェネシス（生合成）を調節します。 関連文献： PMID:37328606
• GRB2は、停止フォーク（stalled forks）でのRAD51の安定化およびMRE11のリクルートを調節することにより、複製ストレス応答および相同組換え修復（HDR）に関与します。 関連文献： PMID:34348893, PMID:38459011
• 自然に存在するアイソフォーム（Grb3-3）はSH2ドメイン機能を欠いており、優性阻害的に作用し、SOS1結合においてGRB2と競合することでRAS-ERKシグナル伝達および細胞増殖を阻害します。 関連文献： PMID:36171279
• GRB2は主に細胞質に局在していますが、核、エンドソーム、ゴルジ体にも見られ、これはシグナルトラフィッキングにおけるその役割と一致しています。
• 翻訳後修飾には、リン酸化、アセチル化、ユビキチン化（イソペプチド結合）が含まれ、リン酸化チロシン含有タンパク質およびプロリンリッチモチーフとの相互作用を媒介するSH2ドメインおよびSH3ドメインを有しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はC末端SH3ドメインおよび隣接領域を含んでおり、全長GRB2およびそのアイソフォームを認識する可能性があります。モデルシステムでの反応性を確認してください。
• ウェスタンブロットにおいて、GRB2は通常約25 kDaで移動します。適切なローディングコントロールを使用し、ノックダウンまたはノックアウトサンプルでバンドの特異性を検証してください。
• 免疫沈降においては、約25 kDaのIgG軽鎖による干渉を避けるために、クロスリンクングプロトコルまたは軽鎖特異的二次抗体の使用を検討してください。
• 免疫組織化学および免疫蛍光については、各組織タイプにおいて抗原回復およびブロッキング工程の最適化をお勧めします。
• この抗体はマウスおよびラットのGRB2との交差反応性があるため、種をまたいだ研究が可能ですが、種特異的な陽性および陰性コントロールで確認してください。

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