WB、FC、ELISA用ヒトIgEウサギモノクローナル抗体 - P01854

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：IgEの機能と局在

• IgEは、IgEアイソタイプを規定する免疫グロブリン重鎖定常イプシロン領域です。鎖内および鎖間のジスルフィド結合を有する糖タンパク質です。
• IgEの抗原結合特異性は、V(D)J組換えおよび体細胞超変異によって生成される可変ドメインにより決定され、高親和性での認識を可能にします。 関連文献： PMID:17576170、PMID:20176268
• 分泌型IgEは、肥満細胞、好塩基球、好酸球上の高親和性受容体FCER1Aに結合することで、アレルギー反応および抗寄生虫反応を媒介し、脱顆粒とヒスタミン、ロイコトリエン、サイトカインの放出を引き起こします。 関連文献： PMID:25629393、PMID:33840121、PMID:8114916、PMID:8551243
• IgEは低親和性受容体FCER2とも相互作用し、マクロファージでは寄生虫の殺傷を促進し、B細胞では抗原提示を増強します。 関連文献： PMID:7544003、PMID:2167225
• 膜結合型IgEには長型および短型のアイソフォームが存在し、B細胞受容体（BCR）複合体を形成します。BCRの抗原架橋は、IgE陽性B細胞の生存と分化を制御します。
• IgEの発現は、IL-4およびCD40による刺激を受けたBリンパ球で主に認められ、Th2型免疫応答と関連しています。
• IGHE遺伝子の選択的スプライシングにより、分泌型と2種類の膜結合型アイソフォームが生成され、それぞれ異なるシグナル伝達特性を有します。
• 調節異常をきたしたIgE応答は、アレルギー性疾患およびアナフィラキシー症状の一因となります。 関連文献： PMID:25629393、PMID:33840121、PMID:7544003

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトIgE定常領域のアミノ酸104～428に相当し、CH2～CH4ドメインをカバーしています。この設計により、分泌型および膜結合型アイソフォームに共通するFc領域を確実に認識できます。
• ウエスタンブロット（WB）では、還元条件の使用を検討してください。観察される分子量は記載どおり約47 kDaとなる可能性がありますが、糖鎖付加によりバンドがシフトしたり、スメアが生じたりする場合があります。
• フローサイトメトリー（FC）では、B細胞上の膜結合型IgE、または好塩基球／肥満細胞上のFc受容体に捕捉されたIgEの検出に適しています。適切なアイソタイプ対照およびFcブロッキング工程の実施を推奨します。
• ELISAでは、総IgE定量のための捕捉試薬または検出試薬として使用できます。コーティング濃度を最適化し、適切なポリクローナルまたはモノクローナル抗IgE検出抗体と組み合わせてください。
• 血清／血漿中のIgE濃度は低いため、精製IgEタンパク質を用いた標準曲線により、サンプル調製およびアッセイ感度を確認してください。

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