WB、ELISA用 IKKα ウサギモノクローナル抗体 - O15111

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景: IKKα (CHUK) の機能と局在

• IKKα (CHUK) はセリン/スレオニンタンパク質キナーゼであり、IKK複合体の触媒サブユニットとして機能し、IκB阻害因子をリン酸化してそのユビキチン化とプロテアソーム分解を引き起こすことで、カノニカルNF-κBシグナル伝達経路において中心的な役割を果たす。
  関連文献: PMID:18626576 PMID:9244310 PMID:9252186

• また、ノンカノニカルNF-κB経路にも関与しており、MAP3K14によって活性化されたIKKαホモ二量体がNFKB2/p100をリン酸化し、そのp52へのプロセシングとRelB-p52複合体の形成を誘導し、B細胞生存とリンパ器官形成を調節する。
  関連文献: PMID:20501937

• IKKαは、カノニカルおよびノンカノニカルNF-κB経路の両方に対して負のフィードバック制御を及ぼす：炎症性遺伝子活性化を制限するためにA20ユビキチン編集複合体の組み立てを促進し、またMAP3K14/NIKをリン酸化して不安定化させる。
  関連文献: PMID:21765415

• 核内では、IKKαはCREBBPをリン酸化してその転写活性とヒストンアセチルトランスフェラーゼ活性を増強し、またヒストンH3のSer-10をリン酸化し、それに続くCREBBPによるLys-14でのアセチル化を促進して、NF-κB応答性プロモーターにおけるクロマチンアクセシビリティを調節する。
  関連文献: PMID:17434128 PMID:12789342

• IKKαはFOXO3をリン酸化し、そのアポトーシス促進活性を調節する可能性がある。
  関連文献: PMID:15084260

• ミトファジーの文脈では、IKKαはAMBRA1をリン酸化し、ATG8ファミリータンパク質との相互作用を促進してミトファジー活性を刺激する。
  関連文献: PMID:30217973

• 本タンパク質は広く発現しており、シグナル伝達と転写調節における二重の役割に一致して、細胞質と核の両方に局在する。

• 主要な翻訳後修飾にはアセチル化とユビキチン結合が含まれる。また、IKKαにはそのキナーゼ機能に必須のATP結合ドメインが含まれる。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトIKKαのN末端アミノ酸1-100に対応する。この領域はマウスでも保存されている可能性があり、報告されている交差反応性を支持する。大規模な実験の前に、関連するサンプル系で検証すること。
• ウェスタンブロットでは、約85kDaに予想されるバンドが観察されるはずである。特定のライセートに対して抗体希釈率とブロッキング条件を最適化すること。
• ELISA適用では、抗体反応性を確認するための陽性コーティング抗原として免疫原ペプチドの使用を検討し、必要に応じてマウスIKKαとの交差反応性をテストすること。
• 複数のアイソフォームまたは翻訳後修飾型が追加のバンドを生じる可能性があることに注意し、特定のモデル系については最新の文献を参照すること。

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