[KO検証済み] Anti-AIF ウサギポリクローナル抗体（WB、IF、IHC、ELISA用） - O95831

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：AIFの機能と局在

• AIFはプログラム細胞死タンパク質8（PDCD8）とも呼ばれ、ヒトではAIFM1遺伝子にコードされています。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが存在し、アポトーシス促進型アイソフォームや脳特異的変異体が含まれます。
• 通常のミトコンドリア代謝においてAIFはNADHオキシドレダクターゼとして機能する一方、カスパーゼ非依存性アポトーシスの主要制御因子として働きます。アポトーシス刺激を受けると、ミトコンドリア膜間腔から細胞質および核へ放出され、クロマチン凝縮と大規模なDNA断片化（パルタナトス）を誘発します。 関連文献: PMID:17094969 PMID:20362274 PMID:23217327
• 核内ではAIFは配列非依存的にDNAに結合し、パルタナトスの特徴であるカスパーゼ非依存性染色体DNA断片化を誘導します。 関連文献: PMID:27178839 PMID:20362274
• AIFはEIF3Gと相互作用し、EIF3翻訳装置を阻害することでタンパク質合成を抑制すると同時に、カスパーゼ-7を活性化してアポトーシスを増幅します。 関連文献: PMID:17094969
• AIFは過酸化水素暴露によって誘発されるカスパーゼ非依存性の固縮細胞死に重要な役割を果たします。 関連文献: PMID:19418225
• ミトコンドリア恒常性においてAIFは、CHCHD4と相互作用してそのミトコンドリアへの移入を制御することで、呼吸鎖の生合成に関与します。 関連文献: PMID:26004228
• 通常条件下ではAIFは主にミトコンドリア膜間腔および内膜に局在します。アポトーシス時には細胞質、核周辺領域、核へと移行します。
• AIFは脳（アイソフォーム5）を除くすべての検査済みヒト組織で発現しており、筋肉、皮膚線維芽細胞、骨芽細胞で検出されます。特にアイソフォーム5はさまざまなヒトがんで頻繁に発現が低下しています。

実験ガイダンス・技術的なヒント

• 免疫原はヒトAIFのC末端領域（アミノ酸334～613番）に対応しているため、複数のスプライス変異体を認識できる可能性があります。ウエスタンブロット（WB）などの応用では、約67 kDaの位置にバンドが検出されることを予定してください。特異性確認のために、ノックアウト（KO）検証済みライセートの使用を推奨します。
• 免疫蛍光法（IF/ICC）では、健康な細胞ではAIFが主にミトコンドリアに局在する一方、アポトーシス誘導時には核へ移行する点にご注意ください。ミトコンドリアと核の両方の染色を維持するために、固定・透過処理条件の最適化を行ってください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、エピトープを露出させるために抗原賦活化が必要な場合があります。標準的なクエン酸ベースまたはEDTAベースのプロトコルで試験してください。AIFを発現する陽性対照組織（例：筋肉、皮膚）で検証を行ってください。
• ELISAでは、ポリクローナル抗体の特性からサンドイッチ法でキャプチャー抗体と検出抗体の両方として使用できますが、モノクローナル抗体とペアにすることでバックグラウンドを低減できる可能性があります。

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