KOバリデーション済み 抗カスパーゼ9 ウサギモノクローナル抗体（WB、IF/ICC、ELISA用）- P55211

コア製品仕様・パラメータ

生物学的背景：カスパーゼ9の機能と局在

• カスパーゼ9はシステイン-アスパラギン酸プロテアーゼ（カスパーゼ）ファミリーの一員で、内在性アポトーシス経路における重要な開始型カスパーゼとして機能します。CASP9遺伝子（GeneID: 842）にコードされており、アポトーシスプロテアーゼMch-6、APAF-3、ICE-LAP6としても知られています。
• Apaf-1に結合すると、カスパーゼ9はアポトソームを形成して活性化します。その後、下流の実行型カスパーゼ（主にカスパーゼ3とカスパーゼ7）を切断・活性化し、アポトーシスを実行します。
• カスパーゼ9は、ABL1/c-Abl依存的な経路でDNA損傷誘発性アポトーシスを促進します。また、ポリ(ADP-リボース)ポリメラーゼ（PARP）とBIRC6をタンパク質分解的に切断します。BIRC6の切断は、DIABLO/SMACがBIRC6-カスパーゼの結合を阻害した後に生じます。 関連参考文献: PMID:36758105 PMID:36758106
• 選択的スプライシングによるアイソフォーム（アイソフォーム2）は触媒活性を欠き、カスパーゼ9のドミナントネガティブ阻害剤として作用し、調節機構を提供しています。
• 組織発現は遍在的で、最も発現レベルが高いのは心臓（特に筋細胞）で、肝臓、骨格筋、膵臓で中程度の発現、その他の組織では低レベルの発現がみられます。
• チモーゲンとして、カスパーゼ9は活性化のためにタンパク質切断を必要とします。さらにリン酸化とユビキチン化によって調節されています。このタンパク質はチオールプロテアーゼに分類され、3D構造は既に解像されています。

実験ガイダンス・技術的なヒント

• 本抗体を作製するために用いられた免疫原はアミノ酸139～416番をカバーしており、この領域には触媒ドメインが含まれます。そのため、本抗体は全長プロフォーム（約46 kDa）と切断された活性断片の両方を検出する可能性があります。カスパーゼの活性化を評価する際は、適切なコントロールを含めることをご検討ください。
• ウエスタンブロッティングでは、未処理のサンプルでは46 kDa付近に主要なバンドが予想されます。アポトーシス誘導後には、追加のより小さなバンドが出現する場合があります。ご使用のモデル系で特異的なパターンを検証してください。
• 本抗体はKOバリデーションされており、ヒト、マウス、ラットのサンプルにおいてカスパーゼ9に対する信頼できる特異性が確認されています。内在性レベルの検出に適しています。
• IF/ICC実験では、カスパーゼ9は主に細胞質に局在しますが、特定のアポトーシス条件下では核に観察されることもあります。固定化と透過処理のプロトコルを適切に最適化してください。
• ELISA用途では、本抗体を他の抗カスパーゼ9クローンとのマッチドペアの一部として評価することで、最適な感度と特異性が得られます。

CamelBioについて：ワンストップ調達ソリューション

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