[KO検証済み] ウエスタンブロット、IF/ICC、ELISA用 抗CDKN2A/p16INK4a ウサギポリクローナル抗体 - P42771 / Q8N726

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: CDKN2A/p16INK4aの機能と局在

• CDKN2Aは、サイクリン依存性キナーゼ阻害因子2A (p16INK4a)、多発性腫瘍抑制因子1 (MTS-1)、CDK4Iとしても知られるタンパク質をコードします。CDK4およびCDK6を阻害し、網膜芽細胞腫タンパク質のリン酸化を防ぐことで、細胞周期の進行を負に制御する役割を果たします。
• このタンパク質は、細胞周期の開始を制御する役割に一致して、細胞質と核の両方に局在します。
• CDKN2Aは、脳や骨格筋などを除く正常組織で広く発現しています。アイソフォーム3は膵臓特異的な発現を示します。
• p16INK4aは、Li-Fraumeni症候群を含む様々ながんで高頻度に変異または欠失している腫瘍抑制因子であり、ゲノム安定性の維持におけるその重要な役割を強調しています。
• このタンパク質は、アセチル化やリン酸化などの翻訳後修飾を受け、その活性と安定性を調節する可能性があります。
• p16INK4aはANKリピートモチーフを含み、CDK4/6に対する阻害機能に不可欠なタンパク質間相互作用を促進します。
• 機能的研究は、p16INK4aの誘導がG1期での細胞周期停止を引き起こすことを示しており、老化と腫瘍抑制におけるその重要性を浮き彫りにしています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトp16INK4a (NP_000068.1)のアミノ酸1–156に対応する合成ペプチドです。ウエスタンブロッティングでは、CDKN2Aを発現することが知られているヒト細胞株からの全細胞溶解物の使用を検討してください。本製品はKO検証済みであるため、バンド特異性を確認するためにCDKN2Aノックアウト対照溶解物を含めることを推奨します。
• p16INK4aの予測分子量は約16 kDaですが、選択的スプライシングと翻訳後修飾により、複数のアイソフォーム (8–17 kDa) が検出される可能性があります。低分子量タンパク質用にゲル濃度と転写条件を最適化してください。
• 免疫蛍光法 (IF/ICC) では、適切な固定 (例: 4%パラホルムアルデヒド) と透過処理 (例: 0.1%トリトンX-100) が推奨されます。p16INK4aは核と細胞質の両方に局在するため、細胞全体を撮像する必要があります。
• ELISAアプリケーションでは、この抗体は、標的抗原に対する検証後、キャプチャー試薬または検出試薬として使用できます。最適なシグナルを得るために、適切なコーティングバッファーとブロッキングステップを確保してください。

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