[KO検証済み] IRF3 ウサギmAb - Q14653

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：IRF3の機能と局在

• IRF3はI型インターフェロン（IFN）依存性免疫応答の主要な転写調節因子であり、DNAウイルスおよびRNAウイルスに対する自然免疫において重要な役割を果たします。インターフェロン刺激応答エレメント（ISRE）に結合することで、I型IFN遺伝子（IFN-αおよびIFN-β）およびIFN刺激遺伝子（ISG）の転写を調節します。 関連文献： PMID:22394562 PMID:24049179 PMID:25636800 PMID:11846977 PMID:16846591 PMID:16979567
• 非感染細胞では、IRF3は不活性型として細胞質に存在します。ウイルス感染、二本鎖RNA（dsRNA）、またはToll様受容体（TLR）シグナル伝達を受けると、IKBKEおよびTBK1キナーゼによってリン酸化されます。これにより構造変化が誘導され、二量体化、核移行、およびCREBBPとの結合が起こり、dsRNA活性化因子1（DRAF1）複合体が形成されます。この複合体はI型IFNおよびISG遺伝子を活性化します。 関連文献： PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:27302953 PMID:16154084 PMID:33440148
• IRF3はマクロファージにおいて異なる遺伝子発現プログラムを活性化し、初代マクロファージに顕著なアポトーシスを誘導することができます。センダイウイルス感染に応答して、IRF3はTOMM70:HSP90AA1によってミトコンドリアへリクルートされ、そこでアポトーシス複合体TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAXを形成してアポトーシスを誘導します。 関連文献： PMID:16846591 PMID:25609812
• IRF3は、SARS-CoV-2感染時のIFN応答を調節する主要な転写因子です。 関連文献： PMID:33440148
• 細胞内局在には細胞質、核、およびミトコンドリアが含まれ、シグナル伝達中の動的な調節と一致します。
• 翻訳後修飾には、リン酸化（活性化に重要）、アセチル化、ジスルフィド結合形成、イソペプチド結合、およびUbl結合が含まれます。
• さまざまな組織で恒常的に発現しており、抗ウイルス防御における幅広い役割を担っていることが示されます。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生じ、異なる状況における機能を調節する可能性があります。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトIRF3（NP_001184051.1）のアミノ酸1～260に相当し、DNA結合ドメインおよび調節ドメインを含むN末端領域をカバーしています。この設計により、非リン酸化型とリン酸化型の両方を検出できる可能性があり、総IRF3レベルのモニタリングに適しています。
• ウェスタンブロッティングでは、ウイルス模倣物（例：poly(I:C)）またはインターフェロンで刺激した細胞のライセートを使用して、リン酸化を示す活性化依存的なバンドシフトを観察することを検討してください。ウイルス感染細胞やTLR活性化細胞など、関連するサンプル系で検証してください。
• 免疫組織化学および免疫蛍光では、特にIRF3がリン酸化依存的に核移行することを考慮し、IRF3のネイティブな構造を保持できるよう、抗原賦活化および適切な固定方法を最適化してください。
• 免疫沈降では、IRF3がCREBBPやTBK1などのパートナーと複合体を形成するため、タンパク質間相互作用を維持できる穏やかな溶解条件を確保してください。
• 本抗体は配列相同性に基づきマウスおよびラット種とも反応するため、種間比較研究に利用できます。ただし、特定の実験モデルにおける反応性を確認することを推奨します。

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