WB、IF/ICC、ELISA用MAD1/MAD1L1ウサギポリクローナル抗体 - Q9Y6D9

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：MAD1の機能と局在

• MAD1L1は、有糸分裂紡錘体形成チェックポイントタンパク質MAD1をコードします。MAD1は、mitotic arrest deficient 1-like protein 1、HsMAD1、hMAD1、Tax-binding protein 181としても知られています。
• MAD1は紡錘体形成チェックポイント（SAC）の中核構成因子です。SACは、すべての染色体が中期板で紡錘体微小管に正しく結合するまで後期の開始を防ぎます。 関連文献： PMID:10049595、PMID:20133940、PMID:29162720
• 未結合の動原体において、MAD1は閉じた構造のMAD2L1（C-MAD2）とヘテロ四量体複合体を形成し、開いた構造のMAD2L1（O-MAD2）からC-MAD2への構造変換を触媒します。これは、拡散可能な「後期待機」シグナルを生成する重要な段階です。 関連文献： PMID:10049595、PMID:20133940、PMID:29162720
• 細胞質では、MAD1がMAD2L1を隔離することでSAC機能を損ない、肝細胞癌における染色体不安定性に寄与する可能性があります。
• 細胞内局在は、核、動原体、中心体、紡錘体極、細胞質に及び、有糸分裂中の動的な役割を反映しています。
• 組織特異性：MAD1は、タンパク質レベルで肝細胞癌および肝癌細胞株に発現しています。
• 翻訳後修飾：MAD1はリン酸化、アセチル化、ユビキチン様結合を受け、これらがその安定性および活性を調節する可能性があります。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はヒトMAD1L1の中央領域（aa 360～700）に相当するため、完全長タンパク質および分解産物の可能性がある断片の両方を認識できる可能性があります。WBでバンドパターンを解析する際は、この点を考慮してください。
• WBでは、予測分子量は約83 kDaです。特異性を確認するため、HeLa細胞ライセートやその他の活発に分裂している細胞株など、適切な陽性対照を使用してください。
• IF/ICCでは、核および動原体に局在するMAD1へアクセスするために透過処理が必要です。関連する試料系において、有糸分裂停止条件（例：ノコダゾール処理）下で染色をバリデーションしてください。
• ELISAの性能は、コーティングバッファーおよび抗原提示の方法に依存する場合があります。組換えMAD1タンパク質を参照抗原として、標準的な間接ELISAプロトコルを検討してください。

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