MonoMethyl-Histone H3-K4 ウサギモノクローナル抗体 (Q16695/P68431) - WB、ChIP、IF/ICC、およびエピジェネティクス研究用

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

ヒストンH3はヌクレオソームのコア構成要素であり、DNAを巻き付けてクロマチンへと凝縮させます。この凝縮により、DNAを鋳型として必要とする細胞内機構によるDNAへのアクセスが制限されるため、転写調節、DNA修復、DNA複製、および染色体の安定性において中心的な役割を果たします。DNAへのアクセス性は、ヒストンコードとして知られるヒストン上の複雑な一連の翻訳後修飾や、ヌクレオソームの再構成によって微調整されています。

ヒストンH3は核に局在し、染色体の不可欠な構成要素です。ここでは2つのバリアントが関連します：典型的なヒストンH3.1（H3C1、H3C2などの複数の遺伝子にコードされ、SWISS P68431）は普遍的に発現していますが、ヒストンH3.1t（SWISS Q16695）は精巣特異的です。両者はクロマチン構造において同じ基本的な役割を共有しています。

ヒストンH3のリシン4（H3K4）は、モノ、ジ、トリメチル化、アセチル化などを含む多様な翻訳後修飾の主要なサイトです。H3K4のモノメチル化（H3K4me1）は、通常、エンハンサー領域や活性な遺伝子転写と関連しています。この抗体は、H3K4周辺のモノメチル化ペプチドを用いて作製されており、この修飾状態に対する特異性を提供します。

関連参考文献： PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708.

実験のガイダンスと技術的なヒント

• この抗体はモノメチル化H3K4に特異的です。最適な結果を得るために、特異性を確認するために陽性および陰性コントロールサンプル（例：未修飾、モノ、ジ、またはトリメチル化K4ペプチド）を含めてください。
• ウェスタンブロット (WB)： 核抽出液または全細胞ライセートを使用してください。約16 kDaのバンドが期待されます。一次抗体の最適な希釈倍率を実験的に決定してください（例：開始範囲 1:500–1:2000）し、適切なHRP結合二次抗体と組み合わせてください。
• クロマチン免疫沈降 (ChIP)： ChIPに適しています。クロマチンを架橋し、断片化し、抗体で免疫沈降を行います。既知のH3K4me1ターゲット座位でのqPCRにより濃縮を検証してください。
• 免疫蛍光 (IF/ICC)： 適切に細胞を固定および透過処理してください。核染色のみが期待されます。DAPIなどで対比染色を行い、局在を確認してください。
• IHC-P： 抗原回復が必要な場合があります。各組織タイプに合わせて条件を最適化してください。
• ドットブロット (DB) および ELISA： 非特異的結合を最小限に抑えるために、ペプチド濃度とブロッキング条件を最適化してください。
• 交差反応性： この抗体は、植物（シロイヌナズナ、イネ、コムギ）を含む広範囲の種を認識します。植物サンプルの場合、堅固な細胞壁により抽出プロトコルを調整し、検出条件を最適化してください。

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