モノメチル化ヒストンH3-K9 ウサギモノクローナル抗体 (Q16695/P68431) for WB, IHC, ChIP, ELISA

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

ヒストンH3は、クロマチンの基本反復単位であるヌクレオソームのコア構成要素です。ヌクレオソームはDNAを巻き付け、凝縮することで、転写、複製、修復へのアクセスを調節します。標準的な複製依存性ヒストンH3.1 (UniProt P68431) と精巣特異的バリアントH3.1t (UniProt Q16695) の両方とも、主要な調節修飾が起こる高度に保存されたN末端尾部を共有しています。

ヒストンH3のN末端尾部は、メチル化、アセチル化、リン酸化、シトルリン化など、多様な翻訳後修飾 (PTM) を受けます。これらの修飾は「ヒストンコード」を構成し、クロマチン構造と遺伝子発現を制御します。リジン9 (K9；完全な前駆体の位置10に対応) のメチル化は、重要なエピジェネティックなマークです。モノメチル化されたH3K9 (H3K9me1) は、転写的サイレンシングとヘテロクロマチン形成に関連し、特定のメチルトランスフェラーゼによるさらなるメチル化の基質となることがあります。

このウサギモノクローナル抗体は、ヒトヒストンH3.1 (P68431) のK9周辺の合成モノメチル化ペプチドに対して作製されており、H3K9me1を特異的に検出することができます。免疫原の設計により確認されている通り、非メチル化または異なるメチル化形態（例：H3K9me2/me3）は認識しません。

細胞内局在：ヒストンH3は主に核内に存在し、染色体と関連しています。組織特異性：標準的なH3.1バリアントはほとんどの分裂細胞で発現しますが、H3.1tバリアント (Q16695) は精巣細胞で特異的に発現します。

関連文献: PMID:11242053; PMID:16267050; PMID:17194708.

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はK9周辺の合成モノメチル化ペプチドです。H3K9me1に対する特異性は、非修飾、モノ、ジ、トリメチル化K9ペプチドを陰性および陽性対照としたペプチド競合アッセイで確認する必要があります。
• ウェスタンブロット (WB) およびドットブロット (DB) では、約16 kDaのバンド/スポットが期待されます。適切なヒストン抽出と、全H3抗体を用いたローディングの正規化を確実に行ってください。
• 免疫組織化学 (IHC-P) および免疫蛍光 (IF/ICC) では、特異的な核染色を得るために、各組織/細胞タイプごとに抗原賦活化とブロッキング条件を最適化してください。
• この抗体を用いたクロマチン免疫沈降 (ChIP) は、H3K9me1のゲノム分布をマッピングできます。架橋と抗体量は経験的に最適化する必要があります。モノメチル化特異性を確認するために、シーケンシャルChIPを検討してください。
• H3 N末端の配列保存性が高いため、この抗体は広範囲な種と交差反応することが予測されます。関連するサンプルシステム（例：マウス、ラット）での検証を推奨します。
• ELISAでは、この抗体は、抽出されたヒストンまたはヌクレオソーム中のH3K9me1を定量するための捕捉または検出試薬として使用できます。

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