モノメチル化ヒストンH3-R2 ウサギポリクローナル抗体 (Q16695/P68431) | WB, IF/ICC, ELISA

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：ヒストンH3（H3.1/H3.1t）の機能と局在

• ヒストンH3はヌクレオソームのコア成分であり、DNAを巻き付けてクロマチンへと凝縮します。この凝縮によりDNAのアクセシビリティが制限され、転写調節、DNA修復、DNA複製、染色体の安定性に中心的な役割を果たしています。DNAのアクセシビリティは「ヒストンコード」によって制御されています。これは翻訳後修飾（PTM）とヌクレオソームリモデリングの複雑なセットです。
• 本タンパク質は核と染色体に局在します。
• 関連する主要なアイソフォームは2種類あります。H3.1（複数の遺伝子にコードされ、例えばH3C1、H3C2など、UniProt P68431）はほとんどの体細胞で発現するのに対し、H3.1t（H3-4、HIST3H3、UniProt Q16695）は精巣特異的に発現します。
• ヒストンH3のN末端テイルには多数の翻訳後修飾が生じ、アセチル化、メチル化、リン酸化、シトルリン化などが含まれます。特にアルギニン2位（R2）はメチル化を受けることがあります。この部位の非対称性ジメチル化はPRMT6によって触媒され、転写調節に関与することが知られています。R2のモノメチル化は中間段階であり、特有の機能的役割を持つ可能性があります。本抗体はR2のモノメチル化型を特異的に認識します。 関連文献: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:18079182

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はヒトヒストンH3のR2周辺のモノメチル化合成ペプチドです。ウエスタンブロット（WB）を実施する際は、シグナルを増強するために核抽出物またはヒストン濃縮調製物の使用を推奨します。予測分子量は約15 kDaですが、翻訳後修飾やタンパク質相互作用により、バンドがわずかに高い位置に出現する可能性があります。
• 免疫蛍光法/免疫細胞化学（IF/ICC）では、固定・透過処理条件の最適化が必要になる場合があります。ヒストンH3は核タンパク質であるため、Triton X-100またはメタノールによる透過処理を推奨します。既知の核マーカーと比較して染色パターンを検証してください。
• ELISAでは、非修飾型やジメチル化型と比較してモノメチル化R2に対する特異性を確認するため、メチル化ペプチドをコーティング抗原として使用することを検討してください。
• 交差反応性は広範囲（ヒト、マウス、ラット、その他）で予測されていますが、特に非哺乳類種を対象とする場合は、研究対象の特定のサンプル系で反応性を検証することを推奨します。
• ウサギ由来ポリクローナル抗体として、重要な定量アッセイではロット間の一貫性を評価する必要があります。適切な陽性対照・陰性対照（例：モノメチルペプチドによる競合実験）を含めることで、データの信頼性を向上させることができます。

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