WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用モノメチル化ヒストンH3-R8 (Q16695/P68431) ウサギポリクローナル抗体

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3.1t/H3.1の機能と局在

ヒストンH3はヌクレオソームの主要構成要素であり、DNAをクロマチンに巻き付け、転写、複製、修復のためのアクセスを制限します。ヒストンテールの翻訳後修飾 (PTM) は、これらのプロセスを調節する「ヒストンコード」を構成します。
関連参考文献: UniProt: Q16695, P68431。

ヒトゲノムは複数のH3バリアントをコードしています。H3.1は遍在しており、複数の遺伝子 (H3C1–H3C12) によってコードされていますが、H3.1t (H3-4/HIST3H3) は精巣特異的です。
関連参考文献: UniProt: Q16695。

N末端テールのアルギニン8位 (R8) は、モノメチル化 (この抗体が標的とする)、対称ジメチル化 (PRMT5による)、またはシトルリン化を受ける可能性があります。これらのマークは、クロマチン状態と遺伝子発現に影響を与えます。
関連参考文献: PMID:15345777, PMID:16567635。

ヒストンH3は核と染色体に局在し、予測分子量は約15 kDaです。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はアルギニン8位周辺の合成モノメチル化ペプチドです。抗体は主にモノメチル化H3R8を検出するはずです。同じ部位での対称ジメチル化またはシトルリン化との交差反応性を除外するために、コントロールライセート/ペプチドで特異性を確認してください。
• ウェスタンブロッティングでは、ヒストン濃縮 (酸抽出) がシグナルを改善することがよくあります。期待されるバンドは約15 kDaです。
• IHC-Pでは、熱誘導抗原賦活化と精巣組織 (H3.1tが豊富) を陽性コントロールとして推奨します。
• IF/ICCでは、標的が核内であるため、固定と透過処理を最適化してください。
• ELISAアッセイでは、キャリブレーションのためにモノメチル化ペプチド標準を含めることが有益な場合があります。
• 配列の保存により、ヒト、マウス、ラット、その他の種で反応すると予測されますが、関連するサンプルシステムでの検証が推奨されます。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間のばらつきが生じる可能性があります。常に新しいロットの再滴定と検証を行ってください。

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