MonoMethyl-Histone H4-K20 ウサギ pAb (P62805) – WB、IHC、IF/ICC、ELISA用エピジェネティクス研究抗体

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ヒストンH4の機能と局在

ヒストンH4は、クロマチンの基本単位であるヌクレオソームのコア構成要素です。ヒストンH2A、H2B、H3とともにオクタマーを形成し、その周りにDNAが巻き付くことで、ゲノムを核内にコンパクトに収めています。この構造的役割は、転写、複製、修復、染色体分配を含む、すべてのDNA鋳型プロセスの基礎となります。

ヒストンH4は主に核に局在し、細胞周期を通じて染色体と関連しています。精子形成過程では、特定のアセチル化パターンがその核内局在に影響を与える可能性があります。

ヒストンH4の機能と相互作用は、「ヒストンコード」とも呼ばれる多様な翻訳後修飾（PTM）によって動的に制御されています。これには、複数の残基におけるアセチル化、メチル化、リン酸化、シトルリン化、ユビキチン化、および様々なアシル化が含まれます。このようなマークはクロマチン構造を変化させ、エフェクタータンパク質をリクルートして、遺伝子発現、DNA損傷応答、クロマチンリモデリングを調節します。

これらの中でも、リジン20（H4K20）のメチル化は重要なエピジェネティックなマークです。H4K20のモノメチル化（H4K20me1）は、転写活性化、細胞周期進行、DNA損傷応答に関与しています。この部位におけるモノ、ジ、トリメチル化状態のバランスは、特定のメチルトランスフェラーゼと脱メチル化酵素によって厳密に制御されています。

この抗体は、ヒトヒストンH4のK20周辺領域に対応し、モノメチル修飾を有する合成ペプチドに対して作製されました。H4K20のモノメチル化型のみを特異的に認識するように設計されており、異なるH4K20メチル化状態の生物学的結果を解明するための貴重なツールとなります。

関連参考文献: UniProt P62805

実験ガイダンスと技術的ヒント

• ヒストンH4は真核生物間で高度に保存されているため、この抗体は多くの種と反応することが予測されます。ただし、ヒト/マウス/ラット以外のシステムでは、交差反応性を経験的に確認する必要があります。
• ウェスタンブロッティングでは、ヒストンタンパク質を濃縮するか、酸抽出法を使用してH4K20me1の検出を改善してください。全細胞溶解物では、ヒストンが豊富な非ヒストンタンパク質によってマスクされる可能性があるためです。
• ドットブロット（DB）アプリケーションでは、修飾特異性を確認するために、未修飾およびモノメチル化ペプチドの両方の対照を含めてください。
• 免疫組織化学（IHC）では、ホルマリン固定組織におけるヒストンとDNAの強固な結合のため、抗原賦活化ステップが必要になる場合があります。
• 免疫蛍光法（IF/ICC）を使用する場合は、核マーカーで共染色し、予想される核内局在を確認してください。
• ELISAプロトコルでは、固定化ペプチドまたはヒストン抽出物を使用する必要があります。最適な検出のために、コーティング抗原がモノメチル化K20エピトープを提示していることを確認してください。
• この抗体は、免疫原の設計に基づき、モノメチル-K20に特異的であり、ジまたはトリメチル化K20や未修飾H4は検出しません。それでも、適切な陰性対照（例：H4K20メチル化状態が変化した細胞株）を使用して、ご自身のサンプルシステムでの特異性を検証してください。

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