MonoMethyl-Histone H4-R3 ウサギポリクローナル抗体 | P62805 | WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH4の機能と局在

ヒストンH4はヌクレオソームのコア構成要素であり、その周りに約147塩基対のゲノムDNAが巻き付いています。ヒストンオクタマーの一部として、転写、DNA複製、修復、および染色体の安定性の調整において重要な役割を果たします。ヒストンの動的な翻訳後修飾は、総称して「ヒストンコード」と呼ばれ、クロマチン構造と遺伝子発現を制御します。関連参考文献： UniProt P62805

ヒストンH4は主に核内に存在し、細胞周期を通じて染色体と結合しています。アセチル化H4は、特にステップ11の精子細胞の核内で観察されており、精子形成過程におけるクロマチンの凝縮に関与していることを示しています。関連参考文献： UniProt P62805

ヒストンH4のN末端テールは、アセチル化、メチル化、リン酸化、シトルリン化、および様々なアシル化を含む広範な翻訳後修飾を受けます。アルギニン3（R3；開始メチオニン除去後のプロセッシングタンパク質ではR4に相当）は、モノメチル化、非対称性ジメチル化（PRMT1による）、対称性ジメチル化（PRMT5/PRMT7による）、またはシトルリン化に変換される重要な残基です。本抗体は、アルギニン3位でモノメチル化されたヒストンH4を特異的に認識します。関連参考文献： PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777, PMID:16567635

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原の設計: 本抗体は、ヒストンH4 (NP_003529.1) のアルギニン3位に相当するモノメチル化合成ペプチドを用いて作製されました。特異性を評価する際は、ペプチド競合アッセイや、異なる修飾ペプチドを用いたドットブロットを行い、未修飾またはジメチル化アルギニン3に対してモノメチル化を選択的に認識することを確認してください。
• ウェスタンブロット (WB): ヒストンH4の予測分子量は約11 kDaです。最適な分解能のために、高濃度SDS-PAGEゲル（15%またはグラデーション）が推奨されます。核抽出物または酸抽出ヒストンを使用すると、通常より強いシグナルが得られます。サイズが小さいため、転写効率を確認し、適切なメンブレン（例：PVDF 0.2 µm）を使用してください。
• 免疫組織化学 (IHC-P) および免疫細胞化学/免疫蛍光 (IF/ICC): 主に核内染色パターンが期待されます。パラフィン包埋切片については抗原回復（例：クエン酸バッファー、pH 6.0）、細胞については洗剤透過処理を最適化する必要があります。本抗体はマウスおよびラット組織との交差反応性があるため、多様なモデルシステムにおけるヒストン修飾の研究に適しています。
• ELISA: モノメチル化ペプチドをコーティング抗原として使用し、直接法または競合法ELISAを行うことで、抗体の結合親和性と特異性を定量できます。希釈倍率はアッセイ形式に基づいて滴定する必要があります。
• 種の交差反応性: 本抗体はヒト、マウス、ラットのヒストンH4を認識することが報告されており、ヒストンH4の配列保存性が極めて高いため、その他の広範囲の種でも反応性が予測されます。未検証の種については、免疫原領域におけるペプチド配列の相同性を確認してください。
• ポリクローナル抗体の注意点: ウサギポリクローナル抗体であるため、力価やバックグラウンドにおいてロット間のばらつきが生じる可能性があります。適切な陽性および陰性コントロールを含め、新しいロットごとに実験条件下で再検証してください。

CamelBio: ワンストップ調達パートナー

CamelBioは、IVD原材料のための包括的なワンストップ調達パートナーとして、診断メーカーや研究ラボに高品質で十分に特性評価された試薬を提供します。私たちは、検証済みの抗体ペアの幅広いポートフォリオ、最適化されたモノクローナル/ポリクローナル抗体、バルク補助試薬、そして希少なエピジェネティクス標的のカスタム調達に加え、本製品「MonoMethyl-Histone H4-R3 Rabbit pAb」も提供しています。バイオマーカーアッセイの開発や生産スケールアップの際、CamelBioの統合されたサプライチェーンと専門的なコンサルティングが、コンセプトから臨床に至るまでのあらゆる段階をサポートします。