モノメチル化NONO/p54nrb (R357/R365) ウサギポリクローナル抗体 (Q15233)、WB、IF/ICC、ELISA用途

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：NONO/p54nrbの機能と局在

NONO（Non-POUドメイン含有オクタマー結合タンパク質）はp54nrbとしても知られ、多様な核プロセスに関与する多機能なDNA・RNA結合タンパク質です。二本鎖および一本鎖のDNAとRNAの両方に結合し、SFPQとのヘテロ二量体としてプレmRNAスプライシングに関与し、U5 snRNAと相互作用します。NONOはPSPC1と共にパラスペックルの形成に必須であり、Ku70/Ku80二量体と共にDNA末端を安定化させることで、非相同末端結合（NHEJ）を介したDNA修復に寄与します。

転写調節においては、SFPQおよびNR5A1と複合体を形成してCYP17プロモーター活性を調節します。また、CLOCK-BMAL1のトランス活性化を抑制することで概日時計を制御し、GABA作動性シナプスの構造に影響を与え、ゲノム部位にTET1をリクルートすることで神経分化を促進します。

NONOは自然免疫において重要な役割を持ち、HDP-RNP複合体に集合してIRF3のリン酸化の足場として機能し、DNAウイルス感染に応答するcGAS-STING経路を活性化します。HIV-2感染時には、ウイルスのキャプシドタンパク質p24と相互作用し、cGASによるウイルスDNAの感知を促進します。

細胞内局在としては、NONOは主に核に存在し、核小体、核スペックル、スプライシングスペックルに隣接する点状のパラスペックルに濃縮されます。

NONOは心臓、脳、胎盤、肺、肝臓、骨格筋、腎臓、膵臓、および様々な乳腺腫瘍細胞株で広く発現しています。このタンパク質はアセチル化、リン酸化、メチル化（例：R456のモノメチル化）を含む、多数の翻訳後修飾を受けます。本抗体はアルギニン357および365のモノメチル化型を特異的に認識します。

関連文献: PMID:11525732, PMID:12403470, PMID:26571461, PMID:22416126, PMID:15590677, PMID:11897684, PMID:28712728, PMID:30270045, PMID:9341872, PMID:19608861, PMID:24129315

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本ウサギポリクローナル抗体は、ヒトNONO/p54nrbのR357およびR365にモノメチル化修飾を持つ合成ペプチドを免疫原として作製されました。ウエスタンブロットでは54 kDa付近にバンドが検出されることが予想されます。非メチル化ペプチドによる競合実験とのシグナル強度の比較、またはメチル化特異的コントロールを用いて特異性を検証してください。
• IF/ICCでは、病巣（パラスペックル）に濃縮される核染色が観察される場合があります。局在を確認するために、PSPC1などのパラスペックルマーカーとの共染色を検討してください。
• 本抗体はヒトおよびラットのサンプルと反応することが確認されています。他の種との交差反応性は検証されていないため、ご使用の実験系で事前に確認してください。
• 最適な使用希釈率は用途ごとに実験的に決定する必要があります。開始希釈率として、WBでは1:500～1:1000、IF/ICCでは1:50～1:200を推奨します。必要に応じて調整してください。
• 本抗体は液体状態で提供され、保冷剤で発送されます。受領後は-20℃で保存し、凍結融解の繰り返しは避けてください。

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