モノメチル化YAP1-K342 ウサギポリクローナル抗体 (P46937)、ウエスタンブロット(WB)・ELISA用

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：YAP1の機能と局在

• YAP1（Yes-associated protein 1）は転写コアクチベーターおよびコリプレッサーとして機能し、Hippoシグナル伝達経路の重要な下流エフェクターです。この経路は、細胞増殖を抑制しアポトーシスを促進することで、器官サイズの制御と腫瘍発生の抑制に重要な役割を果たしています（PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750, PMID:21364637, PMID:30447097）。関連参考文献: PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750, PMID:21364637, PMID:30447097。
• LATS1/2キナーゼによるリン酸化によりYAP1は細胞質に隔離され、核内移行が妨げられ、TEAD依存性転写の活性化が抑制されます。このリン酸化依存的制御は、細胞増殖、足場非依存的増殖、上皮間葉転換（EMT）の制御における中心的な役割を担っています（PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733）。関連参考文献: PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733。
• YAP1には、複数のセリン・スレオニン・チロシン残基でのリン酸化をはじめ、ユビキチン化、メチル化など、多くの翻訳後修飾が生じます。リジン342（K342）のメチル化は、本抗体が認識する特異的修飾です。UniProtでは詳細な特徴付けがされていませんが、この部位のメチル化はYAP1の相互作用や安定性に影響を与え、Hippo経路の制御に新たな階層を加える可能性があります。
• YAP1の亜細胞局在は動的に調節されており、低細胞密度では主に核内に局在し、高細胞密度では細胞質に移行します。このプロセスはリン酸化によって調節されています。またYAP1は、機械的刺激に応答してタイトジャンクションや細胞膜に結合することも知られています（PMID:18158288, PMID:20048001, PMID:31835537, PMID:25849865）。関連参考文献: PMID:18158288, PMID:20048001, PMID:31835537, PMID:25849865。
• 組織特異的発現解析から、特定の肝臓がんや前立腺がんでYAP1の発現が上昇していることが明らかになっており、その発がん性が裏付けられています。さらに、ハンチントン病患者の線条体ニューロンでは、トランス活性化ドメインを欠くアイソフォームが検出されています（PMID:16461361, PMID:17974916, PMID:7782338）。関連参考文献: PMID:16461361, PMID:17974916, PMID:7782338。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体はヒトYAP1のK342周辺残基に対応する合成モノメチル化ペプチドで免疫して作製されており、メチル化型に特異的です。WBでの最適な検出を行うために、YAP1を濃縮するための核・細胞質分画プロトコルの使用をご検討ください。局在が存在量に影響するためです。
• ELISAを実施する際は、特異性を確認するために非メチル化ペプチド対照を含めてください。メチル化ペプチドと非メチル化ペプチドを用いた競合ELISAアプローチにより、シグナルの特異性を検証できます。
• マウスおよびラットに対する交差反応性は配列相同性に基づいて予測されていますが、大規模実験を開始する前に、対象の組織または細胞株で反応性を検証してください。
• WBには標準的なブロッキングおよび検出条件が適していますが、非特異的バンドが出現する場合は、抗体希釈倍率（例：1:500～1:2000）やブロッキングバッファーの組成の最適化をご検討ください。

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