NLRP3 ウサギ mAb - Q8R4B8

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：NLRP3の機能と局在

• NLRP3（クリオピリンとも呼ばれる）は、NLRP3インフラマソームを集合させる細胞内センサーであるNLRP（NACHT、LRR、PYDドメイン含有）ファミリーのメンバーです。別名には、NALP3、CIAS1、Pypaf1、Mmig1などがあります。
• センサー成分として、NLRP3は幅広い病原体関連および損傷関連シグナル（例：ATP、ニゲリシン、結晶、アミロイドβ）を検出し、インフラマソームの形成を誘発します。これによりカスパーゼ-1が活性化され、プロIL-1βおよびプロIL-18を活性型に切断し、ガスダーミンDを介してパイロトーシスを誘導します。 関連参考文献： PMID:19362020, PMID:23582325, PMID:26642356
• 活性化にはK⁺流出が必要であり、しばしばトランスゴルジネットワークまたはミトコンドリア-小胞体接触部位への再局在を伴います。インフラマソームの集合には、NLRP3のATPアーゼ活性が必要です。 関連参考文献： PMID:34861190
• NLRP3はまた、転写因子として単独で機能し、IL-4プロモーターに結合してTh2サイトカインの発現を調節することでTh2分化を促進し、アレルギー性喘息や腫瘍増殖に影響を与えます。 関連参考文献： PMID:26098997
• 細胞内局在は動的です：静止状態では、NLRP3は細胞質と小胞体に存在しますが、活性化すると微小管形成中心、ゴルジ装置へ移動し、分泌されます。また、核内にも見られます。
• マクロファージやTh2リンパ球を含む末梢血白血球での高発現は、自然免疫および獲得免疫におけるその役割と一致しています。 関連参考文献： PMID:15302403, PMID:26098997
• 翻訳後修飾には、リン酸化、パルミトイル化、ユビキチン化が含まれ、その活性と安定性を調節します。キーワード：活性化因子、ATP結合、インフラマソーム、ロイシンリッチリピート、リファレンスプロテオーム、Ublコンジュゲーション。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• この抗体はマウスNLRP3のアミノ酸1～150に対して作成されており、N末端PYDドメインを認識することが示唆されます。全長および切断型の両方を検出する可能性があります。
• ウェスタンブロッティング（118 kDaタンパク質）の場合、高分子量タンパク質用に6～8%のSDS-PAGEゲルを使用し、長時間の転送（例：100Vで2時間）を行ってください。LPSおよびニゲリシンで処理したマウスマクロファージまたはTHP-1細胞の陽性対照ライセートを含めてください。
• 免疫蛍光染色の場合、細胞質およびオルガネラ関連のNLRP3にアクセスするために、0.1% Triton X-100で細胞を透過処理してください。活性化依存性の移行を研究するために、オルガネラマーカーとの二重染色を行ってください。
• 免疫沈降では、500 µgのライセートに対して1～2 µgの抗体を使用してください。インフラマソーム複合体を維持するために、タンパク質の架橋または慎重な溶解が必要な場合があります。
• 交差反応性はマウスのみであると報告されているため、適切なマウス組織または細胞系ですべてのアプリケーションを検証してください。

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