WB、IF/ICC、ELISA用 NLRP3 ウサギポリクローナル抗体 - Q96P20

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：NLRP3の機能と局在

• NLRP3（NACHT、LRRおよびPYDドメイン含有タンパク質3）は、クリオピリン、CIAS1、NALP3とも呼ばれ、N末端ピリンドメイン（PYD）、中央NACHTドメイン、C末端ロイシンリッチリピート（LRR）を特徴とするNOD様受容体（NLR）ファミリーの一員です。
• NLRP3インフラマソームのセンサー成分として、ASC（PYCARD）とプロカスパーゼ-1のリクルートを指揮し、カスパーゼ-1の活性化をもたらします。これにより、プロIL-1βとプロIL-18が成熟型サイトカインに切断され、ガスダーミンDを介したパイロプトーシスが引き起こされます。
  関連文献: PMID:16407889 PMID:18403674 PMID:18604214 PMID:27432880 PMID:23582325 PMID:28847925 PMID:31189953 PMID:22801494
• NLRP3は、細胞外ATP、ニゲリシン、尿酸一ナトリウム結晶、コレステロール結晶、アミロイドβフィブリル、環境微粒子など、幅広い刺激に応答します。これらのシグナルはカリウム流出と膜撹乱を誘導し、NLRP3の微小管形成中心（MTOC）および分散型トランスゴルジネットワーク（dTGN）への移行を引き起こします。そこでNLRP3はその塩基性領域を介してホスファチジルイノシトール4-リン酸（PtdIns4P）に結合し、インフラマソームの形成を促進します。
  関連文献: PMID:16407889 PMID:18403674 PMID:18604214 PMID:36442502 PMID:39173637 PMID:30487600 PMID:34554188
• 主にマクロファージで発現し、樹状細胞、B細胞およびT細胞、顆粒球、肺上皮細胞、軟骨細胞、重層扁平上皮（口腔、食道、子宮頸部膣部、膀胱）でも検出されます。
  関連文献: PMID:33231615 PMID:34133077 PMID:11786556 PMID:17164409 PMID:23229815 PMID:12032915
• NLRP3の機能獲得型変異は、クリオピリン関連周期性症候群（CAPS）の原因であり、家族性寒冷自己炎症症候群、マックル・ウェルズ症候群、CINCA/NOMIDを含み、難聴および全身性アミロイドーシスと関連しています。
• 細胞内局在には、細胞質、インフラマソーム複合体、ゴルジ装置膜、小胞体、ミトコンドリアが含まれ、特定の条件下では分泌されたり核内に存在したりします。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はアミノ酸100–210にまたがり、これはヒトNLRP3のPYDドメイン内に位置します。この領域は種間で比較的保存されており、マウスおよびラットの相同体との交差反応性と一致しています。
• ウエスタンブロットでは、マクロファージやその他のNLRP3発現細胞の全細胞溶解物において、約118 kDaに単一バンドが検出されることが期待されます。
• 陽性対照として、NLRP3をアップレギュレーションすることが知られているLPS処理ヒトTHP‑1細胞またはマウス骨髄由来マクロファージの使用を検討してください。
• IF/ICCでは、透過化および固定条件の最適化が必要な場合があります。非刺激サンプルと刺激サンプルを含めることで、インフラマソームスペック形成の可視化に役立ちます。
• ポリクローナル抗体の性質上、ロット間で変動が生じる可能性があるため、特定のサンプルタイプおよび適用における抗体性能を検証してください。適切な対照を用いた予備試験をお勧めします。

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