WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用PDK4ウサギポリクローナル抗体 - Q16654

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：PDK4の機能と局在

• PDK4はミトコンドリアキナーゼであり、ピルビン酸デヒドロゲナーゼ（PDHA1およびPDHA2）のE1αサブユニットを特異的にリン酸化し、PDH複合体を不活性化します。
• PDHの調節を通じて、PDK4はピルビン酸のトリカルボン酸回路への流入を制御し、それによって好気呼吸を抑制するとともに、グルコース酸化よりも脂肪酸利用を促進します。
• PDK4は絶食および飢餓時の代謝適応に不可欠です。血糖恒常性の維持、過剰なケトン体形成の防止、栄養欠乏状態における正常な血液pHの維持に寄与します。
• このタンパク質はN末端トランジットペプチドを介してミトコンドリアマトリックスに局在し、ATP結合性ヌクレオチドキナーゼとして機能します。
• PDK4は広範な組織で発現しますが、心臓および骨格筋で最も高い発現量を示します。これは、代謝需要が高く、燃料を柔軟に利用する組織における重要性を反映しています。
• PDK4は代謝制御に加えて、活性酸素種の生成、接着を失った上皮細胞のアノイキスからの保護、ならびに糖質および脂質代謝の調節を介した細胞増殖にも関与します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトPDK4の広範な内部領域（aa 102～411）にまたがっています。生成されたポリクローナル抗体は複数のエピトープを認識する可能性があり、感度の向上が期待される一方で、適切な陰性対照が必要です。
• ウェスタンブロット（WB）では、約46 kDaの主要バンドが予想されます。既知のPDK4発現を示す組織または細胞（例：心臓、骨格筋）由来のライセート、あるいはsiRNAノックダウンを用いて特異性を検証してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化法を検討し、心臓または骨格筋のホルマリン固定パラフィン包埋切片で抗体を試験してください。ミトコンドリア染色が観察されるはずです。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、ミトコンドリアマーカーとの共染色によりミトコンドリア局在を確認してください。固定および透過化の条件は最適化が必要となる場合があります。
• ヒト、マウス、ラットで交差反応性が報告されています。配列アライメントからエピトープの保存性が示唆されますが、使用者は各自のモデル系で性能を確認してください。

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