フローサイトメトリー用PE標識ウサギ抗ヒトCD117/c-Kitモノクローナル抗体 - P10721

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD117/c-Kitの機能と局在

• CD117はc-Kit、SCFR、またはPBTとしても知られ、KIT遺伝子によってコードされる膜貫通型チロシンプロテインキナーゼ受容体です。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが産生されます（UniProt: P10721）。
• 主要なリガンドは幹細胞因子（SCF/KITLG）です。リガンドの結合により受容体の二量体化と自己リン酸化が誘導され、造血、メラニン形成、配偶子形成、肥満細胞の発達における細胞の生存、増殖、分化を制御する下流シグナルカスケードが活性化されます。
• 活性化されたCD117は、PIK3R1（PI3K）、GRB2、PLCG1などの主要なアダプタータンパク質および酵素をリクルートしてリン酸化し、AKT、RAS/MAPK、STAT（STAT1、STAT3、STAT5）経路の活性化ならびにセカンドメッセンジャーであるDAGおよびIP3の産生を引き起こします。
• CD117は主に細胞膜に局在しますが、細胞内取り込みおよび輸送後には細胞質にも存在します。
• 精巣では、CD117は基底層の精原細胞および間質のライディッヒ細胞で検出され、その発現は射出精子においても維持されています（タンパク質レベル）。 関連文献： PMID:20601678
• このタンパク質は高度に糖鎖修飾されており、細胞外免疫グロブリンドメインと細胞内キナーゼドメインを含み、がん原遺伝子に分類されます。ジスルフィド結合とリン酸化は、構造および機能上の重要な特徴です。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 本抗体はPEに直接結合しているため、二次抗体を必要とせず、CD117のワンステップフローサイトメトリー検出に適しています。
• 免疫原はヒトCD117の細胞外領域（アミノ酸26～520）に相当するため、天然型の細胞表面受容体と反応することが示唆されます。
• フローサイトメトリーでは、使用する細胞種および装置に適した最適濃度を決定するために抗体を滴定してください。非特異的結合を最小限に抑えるため、適切なアイソタイプコントロールおよびFc受容体ブロッキング工程を含めてください。
• 既知のCD117陽性ヒト細胞株（例：TF-1、HMC-1）または初代造血細胞で発現をバリデーションしてください。
• CD117はリガンド刺激により細胞内に取り込まれる可能性があるため、活性化細胞を解析する際は固定および染色のタイミングを考慮してください。

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