フローサイトメトリー用 PE ウサギ抗ヒト FGFR3 モノクローナル抗体 - P22607

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：FGFR3 の機能と局在

• FGFR3 は線維芽細胞増殖因子に対する細胞表面チロシンキナーゼ受容体であり、増殖、分化、アポトーシスを制御します。
• 軟骨細胞の分化および正常な骨格発生に不可欠であり、機能獲得型変異は軟骨無形成症および関連する低身長症を引き起こします。
• リガンドの結合により自己リン酸化が誘導され、FRS2 を介した下流シグナル伝達が活性化され、RAS-MAPK および AKT 経路へつながります。PLCG1 のリン酸化も起こります。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、その中には FGF に結合してシグナル伝達に拮抗し得る分泌型アイソフォーム 3 も含まれます。
• 全長受容体は主に細胞膜に局在し、細胞質小胞および小胞体にも追加のプールが存在します。分泌型アイソフォームは細胞外に存在します。
• 翻訳後修飾には、糖鎖付加、免疫グロブリン様ドメインを安定化するジスルフィド結合、ならびにキナーゼ活性化の一環としてのリン酸化が含まれます。ユビキチン化は受容体の分解を調節します。
• 脳、腎臓、精巣で高い発現が認められる一方、脾臓、心臓、筋肉での発現は低くなっています。胎児組織では、腎臓、肺、腸、脳で高い発現レベルを示します。
• 疾患：FGFR3 の活性化変異は、骨格異形成症、頭蓋骨縫合早期癒合症、難聴に関連しています。膀胱がん、多発性骨髄腫、その他の悪性腫瘍では、過剰発現または恒常的活性化が認められます。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原は細胞外ドメイン（アミノ酸 23～375）に対応しているため、本抗体は細胞表面上のエピトープを認識すると考えられ、 live-cell フローサイトメトリーに適しています。
• FC では、FGFR3 陽性ヒト細胞株（例：RT4 膀胱がん細胞）を使用し、適切なアイソタイプコントロールを含めてください。最適な染色濃度を決定するため、抗体の滴定を行ってください。
• マルチプレックス化する場合は、他の FGFR ファミリーメンバーとの交差反応性を評価してください。使用する系において、ノックアウトまたはノックダウンによる検証で特異性を確認してください。
• 固定および透過処理により細胞内受容体プールの検出が可能になる場合がありますが、エピトープのアクセス性が変化する可能性があります。固定プロトコルは慎重に評価してください。
• 複数のアイソフォームが存在することに注意してください。必要に応じて、アイソフォームの認識を確認するため、検証済みのリファレンス細胞株または組換えタンパク質コントロールを選択してください。

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