FC用PE標識ウサギ抗ヒトSiglec-8モノクローナル抗体 - Q9NYZ4

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Siglec-8の機能と局在

• Siglec-8はSAF-2（sialoadhesin family member 2：シアロアドヘシンファミリーメンバー2）としても知られ、免疫グロブリンスーパーファミリーに属するI型膜貫通糖タンパク質です。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。
• Siglec-8は、シアル酸依存的に血球への接着を媒介し、α-2,3結合型シアル酸を優先的に結合します。また、α-2,6結合に対しても一定の親和性を示します。同一細胞表面上のシス相互作用により、リガンド結合部位がマスクされる場合があります。 関連文献： PMID:10625619、PMID:10856141
• 末端N-アセチルノイラミン酸（シアル酸）およびその下流に位置する6-O-硫酸化ガラクトースを特異的に認識し、Gal-6-硫酸化シアリルLewis X糖鎖エピトープを強く選択します。 関連文献： PMID:27357658
• このタンパク質は主に好酸球、好塩基球、肥満細胞の表面に発現しており、造血研究においてこれらの細胞種の特異的マーカーとなります。
• 細胞内局在は主に形質膜上であり、細胞間相互作用およびシグナル伝達における役割と一致します。
• Siglec-8は、接着分子に特徴的な免疫グロブリン様ドメインおよびジスルフィド結合を含み、翻訳後修飾として糖鎖付加を受けます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は細胞外ドメイン（アミノ酸17～363）に相当するため、本抗体は細胞表面に露出したエピトープを認識すると考えられ、生細胞および非透過化細胞を用いたフローサイトメトリーに適しています。
• フローサイトメトリーで使用する際は、Siglec-8を発現することが知られている関連細胞株または初代細胞（例：好酸球、好塩基球、肥満細胞集団）を用いて、PE標識抗体の至適染色濃度を決定するための滴定を行ってください。
• 非特異的結合を最小限に抑えるため、適切なアイソタイプコントロールおよびFc受容体ブロッキング工程を含めてください。
• ヒト好塩基球、好酸球、肥満細胞におけるSiglec-8の発現報告を考慮し、使用するサンプル系で染色特異性を検証してください。
• 複数のタンパク質アイソフォーム（44、46、54 kDa）が存在しますが、PE結合体は細胞表面検出用に設計されており、分子量の異なるバリアントを識別することはできません。

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