PE ウサギ抗ヒト/マウス Phospho-Zap70-Y319+Syk-Y352 モノクローナル抗体（細胞内フローサイトメトリー用）- P43403

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ZAP70の機能と局在

• ZAP70は、適応免疫に不可欠な70 kDaのチロシンキナーゼであり、活性化時にアダプタータンパク質LATおよびLCP2をリン酸化することにより、T細胞受容体（TCR）シグナル伝達において中心的な役割を果たします。
• TCRとの結合に続き、ZAP70は形質膜のCD3EおよびCD247/CD3Zのリン酸化ITAMモチーフに動員されます。このプロセスは自己阻害を解除し、LCK媒介性のリン酸化を必要とします（PubMed:7509083）。
  関連参考文献： PMID:7509083
• ZAP70は、細胞骨格の再編成、接着、および移動能を制御することにより、T細胞活性化のダイナミクスをさらに調節し、抗原提示細胞への適切なエフェクター機能の伝達を保証します。
• また、ユビキチンリガーゼCBLおよびアダプターSLA/SLA2との相互作用を介してCD247/CD3Zの内在化と分解を仲介することにより、TCRのダウンレギュレーションにも関与し、シグナル終息を調節します。
• ZAP70は、T細胞、ナチュラルキラー細胞、初期胸腺細胞、およびプロ/pre B細胞で発現しており、T細胞およびB細胞の分化と活性化の両方に寄与します。
• このタンパク質は、リン酸化ITAMに特異的に結合する2つのSH2ドメイン、ATP結合キナーゼドメインを含み、リン酸化、アセチル化、ユビキチン化などの翻訳後修飾を受けます。これらは、「Phosphoprotein」、「Ubl conjugation」、「Isopeptide bond」、「Acetylation」などのUniProtキーワードによって強調されています。
• 代替スプライシングによりZAP70の複数のアイソフォームが生成され、疾患関連の変異はTCRシグナル伝達の障害により重症複合免疫不全症（SCID）と関連しています。
• 免疫原部位（Y319）は、ドメイン間B領域における重要な調節リン酸化部位であり、ヒトとマウスの間で高度に保存されています。そのリン酸化はZAP70の活性化に不可欠です。本抗体は、活性化ループ内の配列相同性により、相同部位であるSykのY352とも交差反応する可能性があります。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• この抗体はリン酸化特異的であるため、サンプル処理中にリン酸化レベルを維持するために、すべての溶解、固定、染色バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めてください。
• 刺激細胞と非刺激細胞のシグナルを比較するか、染色前にサンプルをラムダホスファターゼで処理することにより、抗体の特異性を検証してください。
• 本抗体は細胞内フローサイトメトリー（FC intra）について検証されています。最良の結果を得るために、最適化された固定および透過処理プロトコル（例：メタノールまたはサポニン系透過処理の使用）を確認してください。
• T細胞シグナル伝達の研究では、抗CD3/CD28刺激Jurkat細胞またはヒト末梢血単核細胞（PBMC）などの既知のポジティブコントロール、および交差反応性を評価する場合は静止T細胞やSyk欠損B細胞などのネガティブコントロールの使用を検討してください。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

CamelBioは、コンセプトから臨床に至るまでのあらゆるステップをカバーする、IVD原材料調達のための統合的なワンストップソリューションです。ZAP70およびSykキナーゼシグナル伝達の研究のために、検証済みのリン酸化特異的抗体および全タンパク質抗体、組換え抗原、バルク補助試薬、そして希少なターゲットの原材料へのアクセスを含む包括的な製品ポートフォリオを提供します。信頼性の高い高品質なイムノアッセイコンポーネントと技術サポートにより、診断薬開発を効率化するために私たちとパートナーシップを組んでください。