フローサイトメトリー用PEウサギ抗ラットCD25モノクローナル抗体 - P26897

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD25（インターロイキン2受容体αサブユニット）の機能と局在

• CD25は、インターロイキン2受容体αサブユニット、IL-2Rα、またはTAC抗原としても知られ、ラットではIl2ra遺伝子（UniProt P26897）にコードされるI型膜タンパク質です。
• 高親和性インターロイキン2（IL-2）受容体のαサブユニットとして機能します。β（CD122）およびγ（CD132）サブユニットとともにIL-2に結合し、免疫恒常性に不可欠なシグナル伝達を媒介します。
• この受容体は、自己反応性T細胞の活性化および増殖を抑制する制御性T細胞（TREG）の活性を制御することで、免疫寛容において重要な役割を果たします。
• CD25はCD4+Foxp3+制御性T細胞上で恒常的に高レベルで発現し、活性化エフェクターT細胞上では一過性に発現が増加するため、免疫学的研究における重要なマーカーとなっています。
• 細胞外領域には、補体制御タンパク質に特徴的でリガンド結合に関与する2つのSushi（CCP/SCR）ドメインが含まれています。
• 主な構造的特徴として、N末端シグナルペプチド、複数のSushiリピート、1本の膜貫通ヘリックス、および短い細胞質テールが挙げられます。このタンパク質はN結合型グリコシル化修飾を受け、鎖内ジスルフィド結合を含みます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• このモノクローナル抗体の免疫原はラットCD25のアミノ酸22～235で構成され、細胞外ドメイン全体に相当します。この設計により、インタクトな細胞上でアクセス可能な天然状態の膜遠位領域を標的とします。
• PE結合抗体であるため、主にフローサイトメトリーを目的として使用します。最適な染色濃度を特定するため、関連する細胞モデル（例：活性化ラット脾細胞またはT細胞株）を用いて初期滴定を行うことを推奨します。
• 陽性染色とバックグラウンドを識別するため、適切なアイソタイプコントロールを使用してください。FcγRを高レベルで発現する細胞を染色する場合は、適切なFc受容体ブロッキングを推奨します。
• CD25の発現は固定および透過化の影響を受けやすいため、細胞表面マーカーを評価する場合は、表面エピトープを保持できるようサンプル調製プロトコルを検証してください。
• CD25を細胞内検出する場合、立体障害によって抗体のアクセス性が変化する可能性があるため、透過化手順の最適化が不可欠です。

CamelBio：ワンストップ調達の橋渡し

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