フローサイトメトリー用 PE/Cyanine7 ウサギ抗ヒト PD-L1/CD274 mAb - Q9NZQ7

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：PD-L1/CD274の機能と局在

• PD-L1（Programmed cell death 1 ligand 1）はB7-H1としても知られ、I型膜貫通タンパク質であり、免疫調節リガンドであるB7ファミリーのメンバーです。
• 抑制性受容体PD-1（PDCD1）のリガンドとして機能し、T細胞活性化の閾値を調節してエフェクター応答を制限することにより、免疫寛容の維持に重要な役割を果たします。 関連文献： PMID:11015443 PMID:28813410 PMID:28813417
• また、未知の活性化受容体を介して、IL-10を産生するT細胞サブセットを共刺激する可能性があります。 関連文献： PMID:10581077
• 腫瘍では、PD-1/PD-L1相互作用が細胞傷害性Tリンパ球（CTL）のエフェクター機能を阻害し、免疫回避に寄与します。この経路を遮断すると、T細胞疲弊を回復させ、抗腫瘍応答を正常化できます。 関連文献： PMID:28813410 PMID:28813417
• 低酸素状態に応答して、PD-L1は核へ移行し、転写共活性化因子としてGSDMCの転写を促進し、パイロトーシスを引き起こします。 関連文献： PMID:32929201
• 細胞内局在は、細胞膜、初期エンドソームおよびリサイクリングエンドソームの膜、核を含み、分泌されることもあります。
• 組織全体で広く発現しており、心臓、骨格筋、胎盤、肺で高レベルに発現します。また、活性化T細胞、B細胞、樹状細胞、ケラチノサイト、単球にも存在します。
• 翻訳後修飾には、糖鎖付加、ジスルフィド結合、ユビキチン化が含まれます。また、このタンパク質は免疫グロブリン様ドメインと膜貫通ヘリックスを特徴とします。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は細胞外ドメインを含むヒトPD-L1のアミノ酸1～290をカバーしており、生細胞上の天然構造を認識できる設計となっています。
• フローサイトメトリーでは、非特異的結合を最小限に抑えるため、Fc受容体ブロッキング試薬および適切なアイソタイプコントロールの使用を検討してください。
• 抗体濃度は使用する細胞種および装置に合わせて最適化してください。開始時の一般的な濃度範囲は0.5～5 µg/mLです。
• 活性化免疫細胞や腫瘍細胞株など、実際に使用するサンプル系で抗体をバリデートし、生細胞と死細胞を区別するために生存性染色色素を含めてください。
• PD-L1は内在化およびリサイクルされるため、穏やかな細胞操作と4°Cでの短時間のインキュベーションにより、細胞表面染色を保持しやすくなります。

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