フローサイトメトリー用 PE/Cyanine7 標識 ウサギ抗ヒト TIM-3/HAVCR2 モノクローナル抗体 - Q8TDQ0

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景: TIM-3/HAVCR2 の機能と局在

• TIM-3/HAVCR2 (CD366) は、自然免疫および獲得免疫を微調整する細胞表面受容体であり、一般的には抑制機能を発揮しますが、細胞コンテキストやリガンドとの結合状況に応じて共刺激能も有します。
  関連文献: PMID:24825777
• Th1 細胞を介した自己免疫および同種免疫応答を抑制し、免疫学的寛容を促進します。また、LCK との会合および LGALS9 依存的な PTPRC のリクルートを介して、NF-κB/NFAT の活性化を阻害し IL-2 分泌を減少させることで、CD8+ T細胞の TCR シグナルを減弱させます。さらに、マクロファージの活性化も調節します。
  関連文献: PMID:14556005 PMID:24337741 PMID:26492563 PMID:11823861
• 制御性T細胞 (Treg) 上では、TIM-3 は Th17 応答を抑制します。一方、NK細胞上では二面的な役割を果たし、LGALS9 との結合により IFN-γ 産生を増強する一方で、自然細胞傷害活性を抑制します。
  関連文献: PMID:24838857 PMID:22323453 PMID:22383801
• ガレクチン-9 (LGALS9) の受容体として機能し、T細胞のアポトーシスと免疫抑制を引き起こす可能性がありますが、この相互作用については議論が続いています。また、TIM-3 はホスファチジルセリンにも結合し、樹状細胞によるアポトーシス細胞の貪食を仲介します。
  関連文献: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• 細胞内局在としては、TIM-3 は細胞膜および細胞間接着部に存在します。その発現は、Th1 リンパ球、制御性T細胞、樹状細胞、NK細胞、上皮組織に及び、HCV や HIV などの慢性ウイルス感染症において顕著に上方制御されます。
• 翻訳後修飾としては、TIM-3 は糖タンパク質であり、ジスルフィド結合、パルミトイル化、リン酸化、ユビキチン化を受け、そのターンオーバーとシグナル伝達相互作用が調節されていることを反映しています。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原 (アミノ酸 22-200) は細胞外ドメイン全体をカバーしているため、この抗体は生細胞フローサイトメトリーにおける表面 TIM-3 の検出に適しています。明るいシグナルと FITC および PE チャネルとのスペクトルオーバーラップの最小化のために、推奨される PE/Cyanine7 標識体の使用をご検討ください。
• TIM-3 の発現は非常に動的であり、T細胞活性化に伴って上方制御されるため、細胞を刺激する（例：抗 CD3/CD28 抗体で）か、既知の活性化条件を含めて検出感度を高めてください。
• 多色パネルを設計する際は、PE/Cyanine7 の光退色および非特異的結合を考慮してください。抗体の希釈系列を作成し、適切なアイソタイプコントロールおよび FMO コントロールを含めて、正確なゲーティングを確保してください。
• 本抗体はヒト試料で検証されています。他の種との交差反応性は明記されていないため、非ヒト細胞を扱う場合は、関連する試料系で検証を行ってください。

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