PE/Cyanine7 ウサギ抗ヒト/サル CD8a モノクローナル抗体（フローサイトメトリー用） - P01732

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：CD8aの機能と局在

• CD8Aは、T細胞表面糖タンパク質CD8のα鎖をコードし、適応免疫における重要な共受容体です。ジスルフィド結合によるα/βヘテロ二量体、またはα/αホモ二量体として存在します。
• CD8α鎖はMHCクラスI分子の共受容体として機能し、抗原提示細胞上のT細胞受容体（TCR）とMHC Iに同時に結合します。これによりSrcキナーゼLCKをリクルートし、細胞傷害性Tリンパ球の活性化、サイトカイン産生、標的細胞の殺傷につながる下流シグナル伝達経路を引き起こします。
• ナチュラルキラー（NK）細胞では、CD8Aホモ二量体は生存メカニズムを提供し、複数の標的細胞との結合と溶解を促進します。また、活性化リンパ球の生存と記憶CD8 T細胞への分化を促進します。
• 細胞内局在は、主に単一膜貫通型I型膜タンパク質として細胞膜にあります。選択的スプライシングにより産生される可溶性分泌型も存在します。
• 組織特異性：胸腺由来T細胞では、CD8は通常α/βヘテロ二量体で構成されます。CD8Aホモ二量体は、NK細胞サブセット、記憶T細胞、上皮内リンパ球、単球、樹状細胞に存在します。ウイルス刺激により形質細胞様樹状細胞で発現がアップレギュレーションされます。
• 翻訳後修飾には、グリコシル化（未修飾体は約26 kDa、成熟体は21、25、30 kDaで観察される、予測より高い分子量の原因）と、脂質ラフトへのタンパク質の固定化に関与するパルミトイル化が含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の作製に用いた免疫原は、CD8Aの細胞外ドメインを含むアミノ酸22-182に対応する組換えタンパク質です。この領域はMHC Iとの相互作用に重要であり、細胞表面に露出しているため、フローサイトメトリー応用に理想的な標的です。
• フローサイトメトリー（FC）では、特定のサンプルに最適な濃度を決定するため、抗体の力価を検定してください。非特異的結合を評価するため、同じ蛍光色素（PE/Cyanine7）で標識した適切なアイソタイプコントロール抗体を含めてください。
• PE/Cyanine7はタンデム色素であるため、色素を分解する可能性のある光や固定剤への長時間の曝露は避けてください。マルチカラーパネルを行う際は、スペクトルオーバーラップを補正するため、補正コントロールの使用を検討してください。
• 既知の陽性および陰性細胞集団（例：ヒト末梢血T細胞（CD8+陽性）対B細胞（陰性）、または適切な細胞株）を用いて抗体性能を検証してください。
• 細胞内CD8Aを検出する場合（例：活性化または組織常在性T細胞）、エピトープと蛍光色素を保持する固定および透過処理条件を最適化してください。

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