Phospho-AKT1-T450 + AKT2-T451 + AKT3-T447 ウサギ mAb for WB, IHC-P, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：AKTファミリーの機能と局在

• AKTファミリーは、AKT1（PKB alpha、P31749）、AKT2（PKB beta、P31751）、およびAKT3（PKB gamma、Q9Y243）の3つの密接に関連するセリン/スレオニンタンパク質キナーゼから構成され、それぞれAKT1、AKT2、AKT3遺伝子によってコードされています。それらは高い配列相同性を共有し、重複しつつも異なる生物学的役割を持っています。
• AKTキナーゼは、多様な下流基質（100以上が報告されている）をリン酸化することにより、代謝、増殖、細胞生存、成長、および血管新生を含む多様な細胞プロセスを調節します。
  関連参考文献： PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• 増殖因子およびPI3Kシグナル伝達によって活性化されると、AKTはSLC2A4/GLUT4の膜移動を介してインスリン誘導性のグルコース取り込みを仲介し、GSK3の阻害によってグリコーゲン合成を促進し、mTORC1経路の活性化を通じてタンパク質合成を刺激します。
  関連参考文献： PMID:11994271, PMID:12150915, PMID:12172553
• AKTは、MAP3K5/ASK1やBADなどのアポトーシス促進因子をリン酸化して不活性化し、アポトーシス抑制遺伝子発現を駆動するCREB1などの転写因子を活性化することにより、細胞生存を促進します。
  関連参考文献： PMID:11154276, PMID:9829964, PMID:10926925
• 細胞内局在には、細胞質、核、細胞膜、およびミトコンドリア膜間腔が含まれ、区画化された細胞応答におけるその広範なシグナル伝達の役割を反映しています。
• 翻訳後修飾、特にリン酸化は、AKT活性に不可欠です。2つの主要な残基（AKT1のThr-308およびSer-473）が完全活性化に不可欠であり、ターンモチーフ（AKT1のThr-450、AKT2のThr-451、AKT3のThr-447に相当）でのリン酸化は、キナーゼの安定性とタンパク質相互作用に影響を与える可能性があります。
• AKT1は広範に発現しており、その発現変化およびリン酸化は癌を含む病態と関連しています。リン酸化AKTレベルの上昇は、乳癌および前立腺癌でよく観察されます。
• AKT1（UniProt P31749）に関連するキーワードには、アポトーシス、糖質代謝、細胞膜、細胞質、キナーゼ、核、リンタンパク質、プロトオンコジーン、セリン/スレオニンタンパク質キナーゼ、および翻訳調節が含まれます。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトAKT1のThr-450領域にまたがる合成リン酸化ペプチドです。この抗体は、それぞれの同等部位（T450/T451/T447）でリン酸化されている場合、AKT1、AKT2、およびAKT3を認識すると期待されます。
• ウェスタンブロッティングの場合、リン酸化を維持するためにホスファターゼ阻害剤を含むライセートを調製します。アイソフォームに応じて48〜55 kDa付近のバンドが期待されます。適切な陽性コントロール（例：増殖因子刺激細胞）と陰性コントロール（未処理またはホスファターゼ処理サンプル）を含めます。
• シグナルのリン酸化特異性を確認するために、ホスファターゼ処理サンプルまたは非リン酸化ペプチドブロッキングコントロールの使用を検討してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原回収条件を最適化し、染色を検証するために陽性/陰性組織コントロールを含めてください。リン酸化特異的シグナルは、固定および処理に影響を受けやすい可能性があります。
• ELISAの場合、適切なキャプチャ/検出試薬とペアにし、既知濃度のリン酸化ペプチドまたは細胞ライセートを使用してアッセイを検証してください。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

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