Phospho-AMPKα1-S496 ウサギモノクローナル抗体（WB、ELISA用） - Q13131

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：AMPKα1の機能と局在

• AMPKα1はPRKAA1遺伝子によってコードされ、細胞の中心的なエネルギーセンサーであるヘテロ三量体AMP活性化プロテインキナーゼ（AMPK）の触媒α-1サブユニットです。
• 細胞内ATP濃度が低下すると、AMPKα1は主要な代謝酵素および転写因子をリン酸化し、同化プロセス（脂質、タンパク質、炭水化物合成）を抑制し、異化経路を促進することでエネルギー恒常性を回復します。関連参考文献： PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• AMPKα1は、アセチル-CoAカルボキシラーゼ（ACACAおよびACACB）、HMG-CoAレダクターゼ（HMGCR）、およびホルモン感受性リパーゼ（LIPE）をリン酸化して不活化することにより、脂質代謝を直接調節し、脂肪酸およびコレステロール合成を制御します。
• また、CRTC2/TORC2をリン酸化（細胞質への隔離につながる）し、GLUT4の細胞膜への移行を促進することで、グルコース恒常性において重要な役割を果たします。
• 代謝だけでなく、AMPKα1はTSC2、RPTOR、およびWDR24のリン酸化を介してmTORC1経路を阻害することにより細胞の成長と増殖を抑制し、ULK1およびWDR45/WIPI4のリン酸化を介してオートファジーを活性化します。関連参考文献： PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:28561066, PMID:36732624, PMID:37079666
• 細胞内局在には細胞質、核、および後期エンドソームが含まれ、代謝調節、遺伝子転写、およびエンドソームシグナル伝達における役割と一致しています。
• AMPKα1は様々な残基でのリン酸化によって調節されるリンタンパク質であり、Ser496でのリン酸化が同定されており、そのキナーゼ活性または局在に影響を与える可能性があります。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• リン酸化エピトープを保持するため、細胞溶解およびサンプル調製中は常にホスファターゼ阻害剤を含めてください。
• ラムダプロテインホスファターゼによる処理、または免疫化に使用したリン酸化ペプチドとの競合反応によって特異性を検証してください。シグナルの消失はリン酸化特異性を確認します。
• ウェスタンブロットでは、ヒトまたはマウスの細胞株で約64 kDaのバンドが期待されます。AICAR、メトホルミン、またはグルコース飢餓によるAMPKの活性化は、検出感度を高める可能性があります。
• ELISAでは、Phospho-AMPKα1 (S496) レベルを定量するために、汎用AMPKα1キャプチャー抗体と組み合わせて本抗体を使用することを検討してください。

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