リン酸化ATR-S428 ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA対応） - Q13535

製品主要仕様・パラメータ

生物学的背景：ATRの機能と局在

• DNA損傷センサーとして機能し、電離放射線、紫外線、複製ストレスに応答してチェックポイントシグナル伝達を活性化します。 関連文献: PMID:10597277 PMID:10608806 PMID:10859164
• コンセンサス配列[ST]-Qに位置するBRCA1、CHEK1、MCM2、RAD17、RBBP8、RPA2、SMC1、p53/TP53を含む下流標的をリン酸化し、DNA複製と有糸分裂を阻害する一方、DNA修復、組換え、アポトーシスを促進します。 関連文献: PMID:11114888 PMID:11418864 PMID:11865061
• DNA損傷フォーカスにおいてヒストンH2AXのSer-139をリン酸化します。これはDNA損傷応答における重要な事象です。 関連文献: PMID:11673449
• FANCD2のユビキチン化に必要であり、脆弱部位の安定性維持および中心体複製の制御に重要な役割を持ちます。 関連文献: PMID:15314022 PMID:12526805
• S期におけるCDK1活性を制限することでS-G2細胞周期移行を調節し、G2期への早期侵入を防止します。 関連文献: PMID:30139873
• 機械的ストレスに応答して核膜に再局在し、CHEK1のリン酸化を介してチェックポイントを媒介します。また、LMNAのリン酸化を介して核膜破裂および微小核膜破裂を促進し、cGAS-STING自然免疫経路を活性化します。 関連文献: PMID:25083873 PMID:37788673 PMID:37832547
• 主に核と染色体に局在し、広範に発現していますが、精巣で最も高い発現が見られます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原がSer428周辺のリン酸化ペプチドであるため、本抗体はこの部位でリン酸化されたATRを特異的に認識します。リン酸化特異性は、試料をホスファターゼで処理するか、非リン酸化ペプチドで競合させることで検証してください。
• ウエスタンブロッティングを行う際は、ATRの分子量が大きい（約301 kDa）ことに注意してください。効率的な転写を確保するため、低濃度のゲル（例：6%または4-12%グラジエント）を使用し、低温（4℃）で一晩など長時間のウェット転写を行ってください。
• ATRは発現量が少ないタンパク質です。免疫沈降による濃縮または高感度検出基質の使用をご検討ください。
• 免疫組織化学および免疫蛍光法を行う際は、適切な抗原賦活化工程を実施し、陰性対照（例：ペプチドブロックまたはホスファターゼ処理切片）を用いて染色の検証を行ってください。
• 試料調製中にリン酸化状態を維持するため、溶解バッファーには必ずホスファターゼ阻害剤を添加してください。
• ウサギポリクローナル抗体の性質上、ロット間でばらつきが生じる場合があります。ご使用の実験条件で再検証を行うことを推奨いたします。

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