WB、ELISA用 Phospho-BRD4-T204 ウサギモノクローナル抗体 - O60885

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：BRD4の機能と局在

• BRD4（ブロモドメイン含有タンパク質4、別名HUNK1）は、アセチル化ヒストンを認識し結合するクロマチンリーダータンパク質であり、エピジェネティックメモリーと転写調節において重要な役割を果たします。 関連参考文献： PMID:20871596, PMID:23086925, PMID:23317504
• BRD4は細胞周期を通じてアセチル化クロマチンと結合したまま存在し、分裂後G1期の遺伝子転写のためにクロマチン構造を維持することで、エピジェネティックメモリーを提供します。 関連参考文献： PMID:22334664, PMID:23317504, PMID:23589332
• 間期において、BRD4はP-TEFb複合体をプロモーターおよび遠位エンハンサーにリクルートし、しばしばJMJD6と協力して、HEXIM1や7SKsnRNAなどの負の調節因子を置換することで、シグナル誘導性遺伝子の転写を調節します。 関連参考文献： PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19596240
• BRD4はまた、アセチル化RELAに結合し、P-TEFbをリクルートすることでNF-κBシグナル伝達を活性化します。 関連参考文献： PMID:19103749
• CK2によるリン酸化後、BRD4はp53/TP53標的プロモーターにリクルートされ、p53を介した転写を調節します。 関連参考文献： PMID:23317504
• DNA損傷応答において、BRD4はコンデンシン-2複合体をリクルートすることでクロマチン絶縁体として機能し、それによりDNA損傷シグナル伝達を抑制し、H2AXリン酸化の拡散を制限します。
• BRD4は広範に発現し、核と染色体に局在し、リン酸化、アセチル化、ユビキチン化など様々な翻訳後修飾を受けます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• ウェスタンブロット（WB）では、約152 kDaのBRD4タンパク質を効果的に分離するために、8%またはグラジエントゲルを用いた標準的なSDS-PAGEプロトコルを使用してください。T204のリン酸化を保持するために、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めてください。
• 抗体特異性は、非リン酸化ペプチド競合試験またはホスファターゼ処理によって検証してください。
• ELISAでは、特異性を評価するためにリン酸化および非リン酸化ペプチドの使用を検討し、コーティング濃度を最適化してください。

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