Phospho-CDK1-T161+CDK2/CDK3-T160 ウサギモノクローナル抗体 (WB、IP、IF用) - P06493

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: CDK1の機能と局在

• サイクリン依存性キナーゼ1 (CDK1、別名CDC2/p34) は高度に保存されたセリン/スレオニンキナーゼであり、真核生物の細胞周期の主要な制御因子として機能し、G2-M期移行を駆動し、分裂期への進入と進行を調整します (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720)。 関連文献: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720
• CDK1活性はサイクリン結合とリン酸化によって厳密に制御されています: 活性化にはCDK活性化キナーゼ (CAK) 複合体 (CDK7/cyclin H/MAT1) によるT161のリン酸化が必要であり、一方、T14とY15での抑制的リン酸化はWEE1とPKMYT1によって媒介されます。G2-M境界でのCDC25ホスファターゼによる脱リン酸化が突然の活性化を引き起こします (PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730)。 関連文献: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• 一度活性化されると、CDK1は100以上の下流基質をリン酸化し、分裂期イベントを調整します。これには、核膜崩壊につながるラミンのリン酸化、紡錘体形成のための微小管関連タンパク質のリン酸化、染色体凝縮のためのヒストンH1のリン酸化などが含まれます (PubMed:2188730, PubMed:2344612, PubMed:37788673)。 関連文献: PMID:2188730 PMID:2344612 PMID:37788673
• 細胞内局在に関して、CDK1は核、細胞質、ミトコンドリア、中心体、および分裂紡錘体に動的に局在し、細胞周期進行中の多様な機能的役割を反映しています。
• CDK1はまた、転写因子 (例: FOXO1)、アポトーシスタンパク質 (例: Bcl-xL、カスパーゼ8)、およびエピジェネティック修飾因子 (例: EZH2) を調節し、細胞周期制御を細胞運命決定やDNA損傷応答と結びつけています (PubMed:18356527, PubMed:19917720, PubMed:20937773, PubMed:20935635)。 関連文献: PMID:18356527 PMID:19917720 PMID:20937773 PMID:20935635
• CDK1は初期胚発生に必須であり、その調節異常はがんにおいて頻繁に観察され、過剰発現または過剰活性化が無制御な増殖に寄与している可能性があります (PubMed:18480403, PubMed:20360007)。 関連文献: PMID:18480403 PMID:20360007
• さらに、CDK1はC型肝炎ウイルス (HCV) が肝細胞に侵入する際の受容体として機能し、細胞周期調節以外の役割を示唆しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトCDK1の活性化ループ内の保存された残基であるリン酸化T161を標的とする合成リン酸化ペプチドです。この抗体は、活性化された (T161リン酸化) 形態のCDK1を認識し、配列相同性によりCDK2およびCDK3のリン酸化T160と交差反応する可能性があります。
• ウェスタンブロッティングでは、リン酸化状態を保持するために細胞溶解物をホスファターゼ阻害剤で処理してください。予測分子量は約34 kDaです。ホスファターゼ処理後のバンドのシフトまたは強度変化をモニターして、リン酸化特異性を確認してください。
• 免疫沈降では、コントロールIgGによる前処理と非変性溶解条件を使用することで、CDK1複合体の検出が改善される可能性があります。
• 免疫蛍光法および免疫組織化学法では、透過化と固定法を最適化する必要があります。抗体は、細胞周期の段階に応じて核、細胞質、および中心体の染色パターンを検出する可能性があります。
• ドットブロットおよびELISAアプリケーションは、サンプル中のリン酸化CDK1レベルのハイスループットスクリーニングに使用できます。

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