Phospho-Cyclin E1-T395 ウサギポリクローナル抗体（WB、IF/ICC、ELISA用）- P24864

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Cyclin E1の機能と局在

• Cyclin E1は、G1/S移行における細胞周期の制御に不可欠なG1/S期特異的サイクリンです。サイクリン依存性キナーゼ2（CDK2）と複合体を形成して活性化し、G1期からS期への進行を駆動します。
• これはサイクリンファミリーに属しており、細胞周期中に濃度が変動し、重要なチェックポイントを制御する調節タンパク質の群です。
• このタンパク質は主に核に局在しており、転写および細胞周期装置の調節におけるその役割と一致しています。
• 組織発現は精巣と胎盤で最も高く、気道上皮細胞では低レベルであり、増殖組織におけるその機能を反映しています。
• 翻訳後修飾には、複数の残基（T395など）でのリン酸化、ユビキチン化、および潜在的なSUMO化が含まれ、これらはタンパク質の安定性と活性を調節します。
• 代替スプライシングにより、異なる調節を受ける、あるいは組織特異的な機能を持つ可能性のあるアイソフォームが生成されます。
• 計算上の分子量は約47,077 Da（UniProt）であり、ウェスタンブロットで観察される約47 kDaのバンドと一致しています。
• UniProtの注釈は、細胞分裂、サイクリン依存性キナーゼ調節、およびプロテオミクス同定への関与を強調しており、正常およびがん細胞の増殖におけるその重要性を裏付けています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はT395を取り囲む合成リン酸ペプチドであるため、この抗体はこの残基でリン酸化されたCyclin E1を特異的に検出するのに理想的です。リン酸化特異性を確認するには、λ-ホスファターゼによる処理、または非リン酸化ペプチドによるブロッキングを検討してください。
• ウェスタンブロットでは、47 kDa付近のバンドが期待されますが、翻訳後修飾により移動度が変化する可能性があるため、特定のサンプル系で分子量を検証してください。
• 免疫蛍光/免疫細胞化学では、核染色が予想されます。局在を確認するためにDAPIまたは他の核対比染色を含め、リン酸化エピトープを保持するために適切な固定/透過処理条件を使用してください。
• ELISAに適用する場合、この抗体はライセート中のリン酸化Cyclin E1を捕捉または検出する可能性があります。アッセイ形式に合わせてコーティングと検出のステップを最適化してください。
• ヒト、マウス、ラットとの交差反応性が報告されています。他の種を使用する場合は、T395周辺の配列アライメントを行い、予備的な検証を実施してください。

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