Phospho-DRP1-S616 ウサギモノクローナル抗体 - O00429

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：DRP1の機能と局在

• ダイナミン1様タンパク質（DNM1L）は一般にDRP1と呼ばれ、大型GTPアーゼであるダイナミンスーパーファミリーの一員で、DLP1、DVLP、Dympleとも呼ばれています。
• DRP1は、ミトコンドリアとペルオキシソームの分裂を媒介します。オリゴマー化して膜に結合した管状構造を形成し分裂部位に巻き付き、GTP加水分解依存的な機構によって膜を収縮させ切断します。 関連文献: PMID:11514614, PMID:12499366, PMID:17301055, PMID:23530241, PMID:23584531, PMID:33850055
• ミトコンドリア膜へのリクルートは、MFF、MIEF1、MIEF2といった受容体によってGTP依存的に促進されます。その後のGTP加水分解によりDRP1が放出され、フィラメントリングが閉じて二重膜が切断されます。 関連文献: PMID:23283981, PMID:23921378, PMID:29899447
• DRP1は有糸分裂時のミトコンドリア分裂を促進し、PRKN依存性経路においてPINK1の下流で作用します。また、Ser-637の周期的なリン酸化によって概日時計に従ったATP生産を制御しています。 関連文献: PMID:19411255, PMID:26992161, PMID:27301544, PMID:29478834, PMID:32484300
• DRP1は小脳を含む正常な脳発生に必要であり、酸化的損傷を抑制することで分裂後のニューロンの生存に不可欠です。また、神経管形成時の発生過程のアポトーシスを促進します。 関連文献: PMID:17460227, PMID:26992161, PMID:27145208
• 全身に遍在的に発現しており、骨格筋、心臓、腎臓、脳で最も高い発現量が認められます。複数のアイソフォームは組織特異的な発現パターンを示し、脳特異的なアイソフォーム1、精巣・骨格筋に多く含まれるアイソフォーム2と3が存在します。
• 亜細胞局在としては、ミトコンドリア外膜、ペルオキシソーム、細胞質、ゴルジ装置、クラスリン被覆ピット、シナプス小胞膜があります。DRP1はリン酸化、アセチル化、S-ニトロシル化、ユビキチン化をはじめとする多様な翻訳後修飾を受けます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はヒトDRP1のSer-616周辺の残基に対応する合成リン酸化ペプチドです。この抗体は、この部位がリン酸化されたDRP1のみを特異的に認識することが期待されています。
• ウェスタンブロッティングでは、S616のリン酸化シグナルを保持するためにサンプル調製時にホスファターゼ阻害剤の使用を推奨します。また、ご使用の実験系において、予測される分子量82kDaの位置にバンドが検出されることをご確認ください。
• 免疫沈降では、抗体量の滴定を行い、最適化された溶解バッファーを使用してリン酸化エピトープを維持してください。ホスファターゼ処理による対照実験を行い、特異性を確認してください。
• 競合ペプチドアッセイを含むELISA用途では、リン酸化特異性を確保するため、リン酸化ペプチドと非リン酸化ペプチドに対する反応性を検証してください。

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