Phospho-EGFR (Y1148) ウサギポリクローナル抗体（WB、ELISA用） - P00533

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：EGFRの機能と局在

• EGFRは受容体型チロシンキナーゼであり、EGFファミリーリガンド（EGF、TGF-α、AREG、エピゲン、ベータセルリン、エピレグリン、HB-EGF）に結合し、受容体の二量体化とY1148を含む主要なチロシン残基の自己リン酸化を引き起こします。 関連文献: PMID:10805725, PMID:27153536
• 自己リン酸化されたEGFRは、GRB2などのアダプタータンパク質のドッキング部位として機能し、下流のシグナルカスケード：RAS-RAF-MEK-ERK、PI3K-AKT、PLCγ-PKC、およびSTATモジュールを活性化します。また、NF-κBを活性化し、RGS16とMUC1を直接リン酸化して、Gタンパク質およびβ-カテニン経路に結合します。 関連文献: PMID:27153536, PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589
• EGFRは、CCDC88A/GIVとの相互作用を介して細胞遊走を正に制御し、学習、記憶、および痛みシグナル伝達に関与します。 関連文献: PMID:20462955
• アイソフォーム2はEGF作用の拮抗薬として機能する可能性があり、卵巣癌でも発現しています。全体として、EGFRは遍在的に発現しています。
• 細胞内局在に関して、EGFRは細胞膜、小胞体、ゴルジ体、核、エンドソームに存在し、分泌もされます。
• ウイルス感染において、EGFRはC型肝炎ウイルス（HCV）の受容体として機能し、CD81-CLDN1複合体形成を促進することで侵入を媒介します。
• キーワード：受容体、チロシンプロテインキナーゼ、プロトオンコジーン、リン酸化タンパク質、糖タンパク質；シグナル伝達に重要で、癌においてしばしば調節異常を起こします。

実験ガイドと技術的ヒント

• ウェスタンブロットでは、134 kDaに適した分子量マーカーを使用し、リン酸化特異性を確認するためにEGF刺激ヒト細胞株由来の陽性コントロールライセートを含めてください。
• 免疫ブロットの前にサンプルをラムダホスファターゼで処理することでリン酸化依存性を確認してください。シグナルの消失はリン酸化特異的結合を確認します。
• ELISAでは、交差反応性を評価するためにリン酸化ペプチドおよび非リン酸化ペプチドコントロールでのコーティングを検討し、抗体希釈率と検出条件を最適化してください。
• この抗体はウサギポリクローナル抗体であるため、HRP標識抗ウサギ二次抗体の使用を推奨します。非特異的結合を最小限に抑えるためにBSAブロッキングを使用してください。

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