リン酸化EGFR-Y869 ウサギポリクローナル抗体（WB・ELISA用） - P00533

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：EGFRの機能と局在

• EGFRは受容体型チロシンキナーゼで、EGFファミリーリガンド（EGF、TGF-α、AREG、エピゲン、ベータセルリン、エピレグリン、HBEGFを含む）と結合することで、受容体の二量体化と自己リン酸化が引き起こされます。 関連文献: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029

• リガンドによって活性化されたEGFRは、RAS-RAF-MEK-ERK、PI3キナーゼ-AKT、PLCγ-PKC、STATモジュール、NF-κBシグナル伝達を含む、複数の細胞内シグナル伝達カスケードを開始します。 関連文献: PMID:27153536 PMID:11116146

• EGFRはRGS16（GTPアーゼ活性を増強する）やMUC1（SRCおよびβカテニンとの相互作用を促進する）などの他のタンパク質を直接リン酸化し、Gタンパク質経路や細胞接着経路と連結します。 関連文献: PMID:11602604 PMID:11483589

• EGFRはCCDC88A/GIVと相互作用することで細胞遊走を正に制御します。GIVはEGFRを細胞膜に保持し、シグナル伝達を持続させます。 関連文献: PMID:20462955

• EGFR遺伝子（別名ERBB1、HER1）は、ERBBファミリーに属する受容体型チロシンキナーゼをコードします。選択的スプライシングによるアイソフォーム（アイソフォーム2）はEGF作用のアンタゴニストとして機能する可能性があり、卵巣がんで発現しています。

• EGFRは主に細胞膜に局在しますが、小胞体、ゴルジ装置、核膜、エンドソームでも検出され、分泌されることもあります。

• EGFRはリン酸化タンパク質であり、キナーゼ活性を制御するY869を含む重要なチロシンリン酸化部位を持ち、グリコシル化、ユビキチン化などの翻訳後修飾を受けます。

• ヒト組織に遍在的に発現しており、C型肝炎ウイルス（HCV）の宿主細胞受容体として働き、肝細胞へのウイルス侵入を促進します。

実験ガイダンス・技術的アドバイス

• 免疫原はヒトEGFRのY869周辺の残基に対応する合成リン酸化ペプチドです。リン酸化特異性を確認するため、フォスファターゼ処理した対照を用意するか、非リン酸化ペプチドで競合させてください。
• ウエスタンブロットではEGF刺激した細胞溶解液を使用し、約134 kDaのバンドが予想されます。マウスおよびラットのEGFRとの交差反応性が報告されていますが、対象の種での検証を行ってください。
• ELISAでは、リン酸化ペプチドをコーティングし、ブロッキングと検出条件を最適化して、シグナル対ノイズ比を向上させることを推奨します。
• ブロットを再プローブする際は、過酷なストリッピング条件を避けてください。リン酸化特異的なシグナルが失われる可能性があります。

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