リン酸化EGFR-Y998 ウサギpAb WB、ELISA用 - P00533

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：EGFRの機能と局在

• EGFRはEGFファミリーのリガンドと結合する受容体型チロシンキナーゼで、複数のシグナル伝達カスケードを活性化し、細胞外のシグナルを適切な細胞応答に変換します。
  関連文献: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960

• 既知のリガンドには、EGF、TGFA/TGF-alpha、AREG、epigen/EPGN、BTC/betacellulin、epiregulin/EREG、HBEGF/ヘパリン結合EGFが含まれます。
  関連文献: PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029

• リガンド結合により、受容体のホモ二量体化・ヘテロ二量体化が誘発され、細胞質側の重要な残基が自己リン酸化されます。これによりGRB2などのアダプタータンパク質が動員され、RAS‑RAF‑MEK‑ERK、PI3K‑AKT、PLCgamma‑PKC、STATモジュールを含む下流のカスケードが活性化されます。
  関連文献: PMID:27153536

• EGFRはNF‑kappa‑Bシグナル伝達カスケードを活性化するほか、RGS16やMUC1などの他のタンパク質を直接リン酸化し、Gタンパク質共役受容体経路やベータカテニンとの相互作用にシグナルを連結します。
  関連文献: PMID:11116146 PMID:11602604 PMID:11483589

• EGFRはCCDC88A/GIVとの相互作用を介して細胞遊走を正に制御します。GIVはEGFRを膜に保持し、細胞遊走を引き起こすシグナル伝達を促進します。
  関連文献: PMID:20462955

• EGFRは細胞膜、小胞体膜、ゴルジ装置膜、核膜、エンドソーム膜、核に局在するほか、分泌型の存在も確認されています。

• ヒトの組織に普遍的に発現しています。アイソフォーム2は卵巣がんにも発現しており、EGF作用のアンタゴニストとして働く可能性があります。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本ウサギポリクローナル抗体は、ヒトEGFRのY998周辺の残基に対応する合成リン酸化ペプチドを免疫原として作製されました。この部位でリン酸化されたEGFRを認識することが期待されています。
• Western blot（WB）では、全長EGFRタンパク質として約134 kDaのバンドが予測されます。リン酸化を保持するため、試料調製時に適切なホスファターゼ阻害剤を使用することを推奨します。
• ELISAでは、本抗体を用いてリン酸化EGFRを検出可能です。リン酸化特異性を確認するため、非リン酸化ペプチドを陰性対照として使用することを推奨します。
• 本抗体はヒト試料で検証済みです。他の種に対する交差反応性は未検討のため、他の種で使用する場合は実験的に検証してください。
• リン酸化特異的抗体全般に言えることですが、ロット間の再現性および最適な使用希釈倍率は、使用する試料系で実験的に決定する必要があります。

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