Phospho-eIF2α-S49 ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC-P対応） - P05198

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：eIF2α（EIF2S1）の機能と局在

• EIF2S1は、開始メチオニルMet-tRNAiを40Sリボソームサブユニットに送達するヘテロ三量体である、真核生物翻訳開始因子2（eIF2）のαサブユニットをコードします。 関連文献: PMID:16289705
• eIF2はGTPおよびMet-tRNAiと共に三元複合体を形成し、40Sサブユニットに結合して43S前開始複合体を生成します。その後mRNAが動員され、GTP加水分解に伴って80S複合体が形成されます。 関連文献: PMID:16289705
• eIF2を再活性化するには、グアニンヌクレオチド交換因子eIF2BによってGDPをGTPに交換する必要があります。 関連文献: PMID:16289705
• ストレス感知キナーゼ（EIF2AK1/HRI、EIF2AK2/PKR、EIF2AK3/PERK、EIF2AK4/GCN2）によるセリン49番（およびその他のセリン残基）のリン酸化により、eIF2αは全般的な翻訳阻害剤に変換され、キャップ依存性タンパク質合成を減弱させる一方で、ATF4やQRICH1などのストレス応答mRNAの翻訳を促進します。 関連文献: PMID:19131336 PMID:33384352 PMID:38340717
• eIF2αはマイトファジーにも関与します。ミトコンドリア損傷時にリン酸化eIF2αがミトコンドリア表面に再局在し、PRKN非依存的なマイトファジーを促進します。 関連文献: PMID:38340717
• 細胞内局在は、細胞質、サイトゾル、ストレス顆粒、ミトコンドリアです。
• 翻訳後修飾にはアセチル化と広範なリン酸化が含まれます。eIF2αはRNAに結合し、開始因子、リンタンパク質、参照プロテオームメンバーに分類されます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原は、ヒトEIF2S1のセリン49番周辺残基に対応するリン酸化特異的ペプチドです。リン酸化状態を維持するため、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を添加し、素早く作業を行ってください。
• ウエスタンブロッティングでは、約36 kDaの位置にバンドが検出されることが予想されます。特異性の確認のため、λ-ホスファターゼでサンプルを処理するか、非リン酸化eIF2α抗体を並行して使用してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性が報告されており、複数種を用いた研究に対応可能です。ご使用のサンプル系での検証をお願いします。
• IHC-P（パラフィン切片を用いた免疫組織化学）では、抗原賦活（例：クエン酸バッファー、pH 6.0）および一次抗体の希釈率を最適化してください。陽性対照および陰性対照組織を必ず含めてください。

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