Phospho-eIF4EBP1 (S65) ウサギモノクローナル抗体（WB、ELISA用） - Q13541

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：eIF4EBP1の機能と局在

• eIF4EBP1（真核生物翻訳開始因子4E結合タンパク質1）、別名PHAS-Iは、真核生物開始因子4E（eIF4E）に結合することにより、キャップ依存性翻訳開始の主要なリプレッサーとして機能します。
• 低リン酸化状態では、eIF4EBP1はeIF4G（eIF4G1およびeIF4G3）と競合してeIF4Eに結合し、それによってeIF4F複合体の集合を防ぎ、翻訳開始を阻害します。
• eIF4EBP1の過リン酸化は、多くの場合mTORC1経路によって媒介され、eIF4Eからの解離を誘導し、eIF4F複合体の形成と翻訳の活性化を可能にします。
• eIF4EBP1は、MAPキナーゼおよびmTORシグナル伝達経路を介して、ホルモン、成長因子、および栄養からのシグナルを統合し、タンパク質合成と細胞成長を制御します。
• これは複数のリン酸化部位（Ser65を含む）を持つリンタンパク質であり、eIF4Eに対する親和性と翻訳を調節する能力を調節します。
• 細胞内では、eIF4EBP1は細胞質と核の両方に局在しており、翻訳制御における役割および核-細胞質シャトリングと一致しています。
• このタンパク質は、リン酸化に加えて、アセチル化およびユビキチン様結合（Ubl）によって翻訳後修飾を受けており、複雑な調節メカニズムを示しています。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• この抗体は特定のリン酸化部位（Ser65）を標的としているため、ラムダホスファターゼで細胞溶解物を処理するか、野生型とリン酸化欠損変異体のシグナルを比較することにより、検出の特異性を確認してください。
• ウェスタンブロットの場合、標準的な手順を使用しますが、リン酸化状態を維持するために、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤が含まれていることを確認してください。BSAのようなブロッキング剤は、リン酸化特異的抗体に典型的な非特異的結合を減らすのに役立ちます。
• ELISAでは、ポジティブコントロールとしてペプチド免疫原をコーティングすることを検討し、リン酸化特異性を確認するために非リン酸化ペプチドを含めてください。
• mTORC1の活性化（インスリンまたは血清刺激によるなど）はSer65リン酸化を増加させ、阻害（ラパマイシンなど）は減少させます。実験に適切な刺激または阻害コントロールを含めてください。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

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