WBおよびELISA用 Phospho-eIF4EBP1-T37/T46 ラビット mAb - Q13541

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：eIF4EBP1の機能と局在

• eIF4EBP1（真核生物翻訳開始因子4E結合タンパク質1）、別名PHAS-Iは、翻訳開始の主要な抑制因子です。
• EIF4Eへの結合においてEIF4G1/EIF4G3と競合することでEIF4E活性を調節します。低リン酸化状態では、EIF4Eと強固に結合し、キャップ依存的な翻訳を抑制します。増殖シグナルに応じた過リン酸化によりEIF4Eからの解離が起こり、eIF4F複合体の組み立てと翻訳開始が可能になります。
• mTORC1およびMAPキナーゼ経路の下流エフェクターとして機能し、ホルモン、増殖因子、栄養に対するタンパク質合成を媒介します。
• 細胞質と核の両方に局在しており、翻訳の調節および核内機能における役割と一致しています。
• リン酸化（T37、T46、T70、S65など）、アセチル化、ユビキチン化（イソペプチド結合およびUblコンジュゲーションとして記載）を含む広範な翻訳後修飾を受け、これらが総合的にその活性と安定性を調節します。
• 配列により決定される分子量は約13 kDa（12580 Da）ですが、リン酸化状態によりSDS-PAGEでの移動度は変化する可能性があります。
• タンパク質合成阻害因子、リンタンパク質に分類され、翻訳調節ファミリーに属します。また、プロテオミクス研究ではリファレンスプロテオーム構成要素としても同定されています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• この抗体は、Thr37およびThr46でリン酸化されている場合のみ、内在性レベルのeIF4EBP1を認識します。
• ウェスタンブロットでは、リン酸化シグナルを保持するために、ライシスバッファにホスファターゼ阻害剤を含めてください。メインのバンドは通常13-20 kDa付近で移動しますが、リン酸化の程度により複数のバンドが現れる可能性があります。
• 細胞を刺激物（インスリン、血清など）で処理してリン酸化を誘導し、オプションでホスファターゼ処理または非リン酸化ペプチドとの競合反応を行うことで、リン酸化特異的シグナルを検証してください。
• ELISAの場合は、コーティング条件と抗体濃度を最適化してください。正規化のために、トータルeIF4EBP1抗体とのペアリングを検討してください。
• ヒトおよびラットでの交差反応性が実証されています。マウスについては、配列の相同性にもかかわらず、交差反応性データには記載されていません。マウスサンプルでの検証が必要な場合があります。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

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