Phospho-IGF1R-Y1165/1166/INSR-Y1189/1190 ウサギポリクローナル抗体 - P08069 / P06213

主な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Phospho-IGF1R/INSRの機能と局在

• インスリン様成長因子1受容体（IGF1R）は、IGF1に高親和性で結合し、IGF2およびインスリンには低親和性で結合する受容体型チロシンキナーゼです。細胞の増殖・生存に中心的な役割を持ち、腫瘍形質転換および悪性細胞の生存に不可欠です。
• リガンドが結合すると、活性化ループのY1165およびY1166を含むチロシン残基で受容体の自己リン酸化が誘発され、IRS1/2、Shc、14-3-3タンパク質などのアダプタータンパク質の動員とチロシンリン酸化が引き起こされます。
• リン酸化されたIRS1は2つの主要なシグナル伝達カスケードを活性化します。1つはアポトーシスを阻害し、mTORを介してタンパク質合成を促進するPI3K-AKT/PKB経路、もう1つは細胞増殖を駆動するRas-MAPK経路です。
• IGF1RはJAK/STAT経路を介してもシグナル伝達を行い、STAT3の活性化が受容体の形質転換活性に必須である可能性があります。さらにJNKキナーゼが活性化されることもあり、IGF1はASK1を介してJNKに阻害効果を及ぼします。
• IGF1Rはインスリン受容体（INSR）とハイブリッド受容体を形成することができます。これらのハイブリッド受容体はIGF1に高親和性で結合し、INSRのアイソフォームによってIGF2およびインスリンに対する結合性が異なる場合があります。 関連文献: PMID:12138094, PMID:16831875
• 細胞内では、IGF1Rは細胞膜に局在します。
• 幅広い組織で発現されており、黒色腫、結腸がん、膵臓がん、前立腺がん、腎臓がんなどの腫瘍でしばしば過剰発現しています。INSRとのハイブリッド受容体としては、筋肉、心臓、腎臓、脂肪組織などに存在します。
• 翻訳後修飾として、自己リン酸化、塩基性残基での切断、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、ユビキチン化があります。未処理前駆体の計算上の分子量は約154 kDaです。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の免疫原は、ヒトIGF1Rの活性化ループにあるリン酸化部位（Y1165/Y1166）を含む合成リン酸化ペプチドで、これらの部位はINSR（Y1189/Y1190）で保存されています。この設計により、両受容体の触媒活性を持つリン酸化型を標的としています。
• ウエスタンブロット解析では、リン酸化状態を維持するために溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を添加してください。IGF1R前駆体の予測分子量は約154 kDa、INSR前駆体は約155/156 kDaであり、成熟受容体はタンパク質分解プロセシングにより複数のバンドとして検出される場合があります。
• ELISAを設定する際は、細胞または組織溶解液中の活性化受容体を確実に検出するため、リン酸化特異的コーティング法または競合ベースのフォーマットの使用をご検討ください。
• マウスおよびラットとの交差反応性が報告されていますが、ご使用のサンプル系での検証を推奨します。

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